[实用新型]一种全自动循环肿瘤细胞阴性富集装置

说明书

技术领域

本实用新型涉及循环肿瘤细胞全自动检测设备领域，尤其涉及一种全自动循环肿瘤细胞阴性富集装置。

背景技术

循环肿瘤细胞(Circulating Tumor Cell,CTC)是存在于外周血中的各类肿瘤细胞的统称，其可自发或通过诊疗操作从实体肿瘤病灶(原发灶或转移灶)脱落，进入体循环系统(如外周血)。大部分CTC进入外周血后会发生凋亡或被吞噬，少数能够逃逸并锚着病灶以外的组织或器官上，进而发展成为转移灶，增加恶性肿瘤患者死亡风险。因此，CTC检测可有效地应用于体外早期诊断、预后评价、个体化治疗(包括快速临床化疗药物筛选和耐药性的检测)、肿瘤复发监测及新的肿瘤药物开发等。

目前，市场上已出现的CTC富集和检测的产品或服务，唯一获得FDA批准的CTC检测设备是CellSearch系统，该系统是基于免疫磁珠分离技术而开发出的检测设备，它利用标记有针对上皮细胞黏着分子(Epithelial Cell Adhesion Molecule,EpCAM)抗体的磁性颗粒进行CTC的捕获，该方法具有特异性强的优点，但是其无法识别未表达目标标记的未知细胞，且其捕获效率还是较低，白细胞的干扰较大。另外，目前的一些CTC检测设备和技术尚没有实现检测过程的全自动化控制，即没有实现血液检测样品和试剂的自动化进样，细胞的自动化捕获及鉴定分析，因此CTC的检测存在过多的人为干预，使得CTC的检测准确性低，检测成本过高。

鉴于循环肿瘤细胞也就是CTC总共有15个分型，而CellSearch只能检测到其中一个型别，漏检率很高，因此，本领域技术人员致力于开发一种以排除法原理筛选并富集CTC的全自动装置。

实用新型内容

本实用新型旨在基于密度梯度离心法提供一种从全血中阴性富集循环肿瘤细胞的方法及其全自动设备，该方法利用不同种类细胞的密度差异将其分层，并用沉淀法弃去主要的干扰细胞，从而获得符合一定密度标准的循环肿瘤细胞。

为实现上述目的，本实用新型提供了一种全自动循环肿瘤细胞阴性富集装置，包括离心单元、转移单元、储料单元和收集分析单元；所述离心单元用于液体的离心以及细胞的染色、清洗和孵育，所述转移单元用于样本、试剂和材料的转移，所述储料单元用于试剂和材料的储存，所述收集分析单元用于收集富集获得的循环肿瘤细胞进行计数或分析。

进一步，所述离心单元以离心机为核心，所述储料单元设置于所述离心单元的周围，所述转移单元被设置于所述装置操作面的上方，其可在所述离心单元和所述储料单元之间转运样本、试剂和材料。

优选地，本实用新型处理的样本为血液样本。

进一步，所述储料单元包括试剂储料仓、耗材储料仓和废弃物储料仓；优选地，还可包括搅拌棒储料仓。

进一步，所述试剂储料仓中至少储存有密度梯度离心液、多联抗体试剂、细胞染色试剂和缓冲液。

优选地，所述试剂包括密度梯度离心液、多联抗体试剂、免疫荧光染色试剂、细胞固定试剂、缓冲液；其中，所述多联抗体试剂可结合至少两种干扰细胞，优选为可结合血液中的白细胞和红细胞；所述细胞染色剂优选为可特异性识别和结合循环肿瘤细胞表面抗原的荧光抗体。进一步，所述试剂还可以包括核酸染色剂、捕获增强试剂、通透试剂中的一种或多种。

阴性富集法中最大的干扰是白细胞和红细胞，上述方法采用多联抗体将白细胞与红细胞结合起来；在本实用新型的一种优选实施方式中，所述结合体的密度较大，经密度梯度离心而沉淀，而作为目标的CTC位于中间层，该层中除了目标CTC以外，还可能有与其密度相类似的其它细胞，这些其它细胞可能也是CTC，或是值得进一步分析研究的非CTC细胞。

优选地，所述耗材包括一次性移液枪头。

进一步，所述离心单元还包括视觉识别系统，用于对离心液体分层的成像、各层吸取液体量和高度的计算。

优选地，所述视觉识别系统的计算方法分为两部分，均是根据视觉识别照片(上下层以光电传感器对颜色加以区分)来计算的：

1)计算需抽掉的上层液体高度值：根据样本所在高度减去照片中上层与下层相接处的高度的差，加上调整的高度(防止抽液过多对下层造成扰动)；

2)计算需添加的液体高度值：用设定的最终高度减去现有液面的高度，必要时还要减去添加目标液体之前所需添加的小剂量试剂的高度。