[发明专利]一种蒙古黄芪病程相关蛋白及其晶体、生长方法和用途

说明书

本发明公开了蒙古黄芪病程相关蛋白及其晶体、生长方法和用途，蒙古黄芪病程相关蛋白具有下述(a)‑(c)任一所述的氨基酸序列：(a)为如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；(b)为与SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列具有至少90％同源性的氨基酸序列；或者(c)具有(a)或(b)所示的氨基酸序列的不丧失生物活性的同系物、衍生物、片段或突变体；本发明首次对AmPR‑10的氨基酸序列进行了公开，有利于实现AmPR‑10的鉴定与功能性研究，进一步发现AmPR‑10在制备治疗特发性肺纤维化的药物中的用途，AmPR‑10的治疗效果明显，作为天然中草药提取物，其来源广泛、毒性小，适于临床应用。

技术领域

本发明涉及蛋白质晶体技术领域，具体涉及一种蒙古黄芪病程相关蛋白及其晶体、生长方法和用途。

背景技术

中草药主要根据所含有的活性成分入药，为了充分利用资源和探索新的活性成分，其中蛋白质成分逐渐受到关注。近年来，已有许多具有生物活性的蛋白质相继在多种中草药中被发现。分离纯化中草药中的活性蛋白质成分，以期找到一些新的具有生物活性的蛋白质源，已经成为国内外众多研究工作者的一个重要方向。

黄芪系豆科(Leguminasae)蝶形花亚科(P即ilionoideae)黄芪属(AstragalusLinn)膜荚黄芪(Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge.)及蒙古黄芪(Astragalusmembranaceus(Fisch)Bge.var.mongholicus(Fisch)Hsiao)的干燥根，是我国著名的常用滋补中药材，具有补气升阳、固表止汗、脱毒生肌、利水脱肿等功效。据《中国药典》2015年版记载，黄芪根含黄芪多糖、黄酮、皂昔、微量元素和氨基酸等多种有效成分，在免疫调节、抗肿瘤、抗衰老、抗应激、调节血糖和血压、抑制病毒、抗菌等方面具有显著疗效。

作为一种天然的中草药，黄芪具有丰富的药用活性成分，目前关于黄芪中有效成分的研究主要集中在多糖、皂甙和黄酮等成分上，黄芪中蛋白质含量很高，但对蛋白的功能性研究很少。

病程相关蛋白(pathogenesis-related protein，PR)是植物在病原体侵染下或是外界环境的压力、化学物质和植物自身激素因素促使下由自身编码的具有抵抗作用的蛋白。目前，根据蛋白的分子量、等电点、氨基酸序列、血清学性质和生物学功能等方面性质，病程相关蛋白被划分为14个家族，即PR-1至PR-14。中国专利文献CN1928079A中从蒙古黄芪植株中分离出一种具有核糖核酸酶活性的蛋白，SDS-PAGE测得的亚基分子量17.2kDa。因为该核糖核酸酶活性蛋白与病程相关蛋白(pathogenesis-related protein， PR)具有同源性，被命名为蒙古黄芪病程相关蛋白(Astragalus membranaceus pathogenesis-relatedprotein，AmPR-10)。上述的文献中公开了黄芪中的活性蛋白AmPR-10，以及AmPR-10的核糖核酸酶活性，但目前尚未报道 AmPR-10的氨基酸序列，不利于进一步验证AmPR-10的结构、功能以及其在疾病治疗方面的用途。此外，上述纯化后的AmPR-10以溶液形式存在，在蛋白质保藏过程中容易失活，不能长期存储、使用，不利于实现对 AmPR-10的功能性研究和AmPR-10作为疾病治疗药物的药用效果。

发明内容

因此，本发明要解决的第一个技术问题在于提供一种蒙古黄芪病程相关蛋白，并提供了其核心的氨基酸序列。

本发明要解决的第二个技术问题在于克服现有技术中纯化的蒙古黄芪病程相关蛋白存在稳定性低、易降解的缺陷，从而提供一种稳定性高，适于长期保存、运输，对保存条件要求低的蒙古黄芪病程相关蛋白的晶体。

本发明要解决的第三个技术问题在于提供所述的蒙古黄芪病程相关蛋白在制备治疗特发性肺纤维化的药物方面的新用途。

本发明提供了一种蒙古黄芪病程相关蛋白，具有下述(a)-(c)任一所述的氨基酸序列：