[发明专利]一种6-苄基腺嘌呤胶体金免疫检测试纸条

说明书

本发明公开一种6‑苄基腺嘌呤胶体金免疫检测试纸条，属于免疫分析测试领域。所述试纸条包括PVC底板，PVC底板上从左至右依次固定样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜及吸水垫；所述胶体金垫包被有胶体金标记的6‑苄基腺嘌呤抗体；所述硝酸纤维素膜上有检测线和质控线，检测线区包被有6‑苄基腺嘌呤核苷蛋白质偶联物，质控线区包被有羊抗鼠IgG多抗。本发明通过抗原抗体高效特异性竞争结合特性，制备6‑苄基腺嘌呤检测用胶体金免疫检测试纸条，具有灵敏度高、特异性强、简单快捷、易于操作等优点。

技术领域

本发明属于免疫分析测试领域，具体地，涉及一种6-苄基腺嘌呤胶体金免疫检测试纸条。

背景技术

6-苄基腺嘌呤是一种人工合成的植物生长调节剂，其作为细胞分裂素被广泛添加于植物生长培养基中。2015年农业部等３家部委机构共同要求禁止６-苄基腺嘌呤被用于豆芽产品中（国家食品药品监督管理总局，2015），然而由于6-苄基腺嘌呤药效良好、价格低廉，其在豆芽生产中的添加屡禁不绝。因而加强对6-苄基腺嘌呤残留量监测对于保证食品质量安全十分重要。

目前已报道一系列６-苄基腺嘌呤残留量的检测方法，包括一系列的仪器分析方法。但仪器分析方法需要昂贵的仪器设备及专业操作人员，且样品前处理繁琐费时、检测费用高，难以满足高通量、快速、在线检测的需要。发展具有更广谱性和稳定性的6-苄基腺嘌呤快速检测方法迫在眉睫。

发明内容

本发明的目的在于提供一种快速检测6-苄基腺嘌呤的胶体金免疫试纸条，采用该试纸条检测6-苄基腺嘌呤，检测时间短、成本低、结果易判断，实用性强，非常适合豆芽等果蔬中6-苄基腺嘌呤残留量的检测。

本发明的技术方案为：本发明的6-苄基腺嘌呤的胶体金免疫检测试纸条，包括PVC底板，PVC底板上从左至右依次固定样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜及吸水垫；所述胶体金垫包被有胶体金标记6-苄基腺嘌呤抗体；所述硝酸纤维素膜上包被有6-苄基腺嘌呤核苷蛋白质偶联物和羊抗鼠IgG多抗。

所述6-苄基腺嘌呤的胶体金免疫检测试纸条的制备方法，包括以下步骤：

1.6-苄基腺嘌呤核苷蛋白质偶联物的制备；

一种6-苄基腺嘌呤核苷蛋白质偶联物，其结构式如式（Ⅰ）所示：

（Ⅰ）

所述protein（即载体蛋白）为牛血清白蛋白（BSA）或卵白蛋白（OVA）。

一种6-苄基腺嘌呤核苷蛋白质偶联物的制备，包括以下步骤：

（1）将6-苄基腺嘌呤核苷溶于PB缓冲液中得到6-苄基腺嘌呤核苷溶液；

（2）向（1）所述6-苄基腺嘌呤核苷溶液加入丙酮，反应；

（3）向（2）加入N,N'-羰基二咪唑，反应；

（4）将（3）溶液调节为pH=8，加入6-氨基己酸，反应；

（5）向（4）加入乙酸，反应；

（6）向（5）加入N-羟基琥珀酰亚胺，反应；

（7）向（6）加入蛋白溶液，反应；

（8）将（7）液进行透析，收集透析液。

2.6-苄基腺嘌呤抗体的制备