[发明专利]一种卷烟主流烟气中微量生物碱和亚硝胺的测定方法

说明书

本申请提供了一种卷烟主流烟气中微量生物碱和亚硝胺的测定方法，包括：a)抽吸卷烟，并收集卷烟主流烟气中的总粒相物，加入萃取溶剂和氘代同位素内标进行萃取，收集萃取液；b)将所述萃取液与QuECHERS试剂漩涡混合0.5min～10min，以9000rpm～11000rpm的速度离心3～7min，得上清液；c)采用UPLC‑HR‑MS对所述上清液中的微量生物碱和烟草特有亚硝胺进行定量分析。本发明方法可同时测定卷烟主流烟气中6种微量生物碱(假木贼碱、降烟碱、麦斯明、可替宁、尼可替林和N‑甲酰基降烟碱)和4种特有亚硝胺(NNN、NNK、NAT和NAB)，灵敏度和准确度高，选择性强，适用于批量卷烟滤嘴中微量生物碱和亚硝胺的快速测定。

技术领域

本发明属于烟草制品化学成分的理化检验技术领域，具体涉及一种卷烟主流烟气中微量生物碱和亚硝胺的测定方法。

背景技术

微量生物碱(如假木贼碱、降烟碱、麦斯明、可替宁、尼可替林何N-甲酰基降烟碱)是烟草和卷烟烟气中最重要的化学成分之一。烟草微量生物碱的含量对烟叶的内在品质、安全性和可用性具有重要影响，微量生物碱与香气量、浓度、杂气、刺激性存在极显著的正相关,微量生物碱中的假木贼碱、新烟碱分别与余味存在显著的负相关。烟草中的微量生物碱新烟草碱和假木贼碱可以分别转化为N-亚硝基假木贼碱(NAB)和N-亚硝基新烟碱(NAT)，N-亚硝基降烟碱(NNN)和4-(甲基亚硝胺基)-1-(3-吡啶基)-1-丁酮(NNK)具有1级致癌活性，NAB、NAT具有3级致癌活性。因此，准确测定卷烟中烟草生物碱和烟草特有亚硝胺的含量并研究其转移规律，对于保证烟草的吸食品质以及客观评价卷烟安全性具有十分重要的意义。

到目前为止，卷烟主流烟气中微量生物碱的测定方法主要有气相色谱-质谱法和气相色谱串联质谱法等，这些方法需要使用强碱-氢氧化钠对样品进行前处理，而氢氧化钠对质谱仪器具有一定的腐蚀性。卷烟主流烟气中烟草特有亚硝胺的测定方法主要有气相-热能分析仪法和液相色谱-串联质谱法等，方法的样品前处理过程往往比较复杂。

发明内容

为了解决上述技术问题，本发明的目的在于提供一种卷烟主流烟气中微量生物碱和亚硝胺的测定方法，其具体技术方案如下：

一种卷烟主流烟气中微量生物碱和亚硝胺的测定方法，包括以下步骤：

a)抽吸卷烟，并收集卷烟主流烟气中的总粒相物，加入氘代同位素内标并进行加速溶剂萃取，收集萃取液；

b)将所述萃取液与QuECHERS试剂漩涡混合0.5min～10min，以9000rpm～11000rpm的速度离心3～7min，得上清液；

c)采用UPLC-HR-MS对所述上清液中的微量生物碱和烟草特有亚硝胺进行定量分析。

优选的，步骤a)所述萃取溶剂为甲醇和/或乙腈，其加入体积为10～100mL。

优选的，步骤a)所述氘代同位素内标为假木贼碱-D4、降烟碱-D4、麦斯明-D4、可替宁-D3和尼可替林-D9中的一种或多种。

优选的，步骤a)所述萃取为超声萃取或振荡萃取，萃取时间为20～80min，萃取溶液的体积为10～100mL。

优选的，所述UPLC-HR-MS的流动相包括流动相A和流动相B，所述流动相A为乙酸铵水溶液，所述流动相B为甲醇；

其梯度洗脱程序设置为：0～0.5min：2％B，0.5～4min：2％→98％B，4～7min：98％B，7～8min：98％→2％B，平衡2min。

优选的，所述UPLC-HR-MS的色谱柱温度为25℃～60℃。

优选的，所述流动相的流速为0.1～0.5mL/min。