[发明专利]自分泌CD40抗体且靶向ErbB受体家族的CAR-T细胞及其用途

权利要求书

1.一种T细胞，其特征在于，所述T细胞：

（1）含有表达靶向ErbB受体家族的嵌合抗原受体的编码序列和CD40激活性抗体的编码序列；和/或

（2）表达靶向ErbB受体家族的嵌合抗原受体和CD40激活性抗体；

所述嵌合抗原受体包含通过刚性接头连接的T1E肽段和Herin肽段、铰链区、跨膜区、胞内共刺激信号域和胞内信号域，所述CD40激活性抗体从N端到C端依次含有轻链信号肽、抗CD40单链抗体和IgG4Fc，所述IgG4Fc的氨基酸序列如SEQ ID NO:1第269-497位氨基酸残基所示。

2.如权利要求1所述的T细胞，其中，所述抗CD40单链抗体中抗体轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:1第21-146位氨基酸残基所示，所述抗CD40单链抗体中的重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO:1第161-268位氨基酸序列所示。

3.如权利要求1所述的T细胞，其中，所述T细胞的基因组中整合了CD40激活性抗体的表达框以及靶向ErbB受体家族的嵌合抗原受体的表达框。

4.如权利要求1所述的T细胞，其特征在于，所述嵌合抗原受体还包含信号肽。

5.如权利要求4所述的T细胞，其特征在于，所述嵌合抗原受体具有以下一项或多项特征：

所述信号肽为CD8信号肽、CD28信号肽或CD4信号肽；

所述铰链区选自CD8的胞外铰链区、IgG1 Fc CH2CH3铰链区、IgD铰链区、CD28胞外铰链区、IgG4 Fc CH2CH3铰链区和CD4的胞外铰链区；

所述跨膜区为CD28跨膜区、CD8跨膜区、CD3ζ跨膜区、CD134跨膜区、CD137跨膜区、ICOS跨膜区和DAP10跨膜区中的一种；

所述胞内共刺激信号域包括共刺激信号分子的胞内结构域，包括CD28、CD134/OX40、CD137/4-1BB、淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶、诱导性T细胞共刺激因子（ICOS）和DNAX激活蛋白10的胞内结构域；和

所述胞内信号域为CD3ζ胞内信号域或 FcεRIγ胞内信号域。

6.如权利要求5所述的T细胞，其特征在于，所述嵌合抗原受体具有以下一项或多项特征：

所述信号肽为CD8信号肽；和

所述铰链区为CD8铰链区或IgG4 CH2CH3铰链区。

7.如权利要求6所述的T细胞，其特征在于，所述嵌合抗原受体具有以下一项或多项特征：

所述CD8信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:5第1-22位氨基酸残基所示；

所述T1E的氨基酸序列如SEQ ID NO:5第23-77位氨基酸残基所示；

所述Herin的氨基酸序列如SEQ ID NO:5第93-171位氨基酸残基所示；

所述刚性接头是EAAAK接头，其氨基酸序列如SEQ ID NO:5第78-92位氨基酸残基所示；

所述铰链区为IgG4 CH2CH3铰链区，其氨基酸序列如SEQ ID NO:5第172-399位氨基酸残基所示；

所述跨膜区为CD28跨膜区，其氨基酸序列如SEQ ID NO:5第400-427位氨基酸残基所示；

所述共刺激信号分子胞内结构域是CD28胞内结构域，其氨基酸序列如SEQ ID NO:5第428-468位氨基酸残基所示；和

所述胞内信号域为CD3ζ胞内信号域，其氨基酸序列如SEQ ID NO:5第469-580位氨基酸残基所示。