[发明专利]一种间型弯孢菌菌株及其应用和除草剂

说明书

本发明提供一种间型弯孢菌菌株及其应用，所述间型弯孢菌菌株命名为mt‑3，其于2016年12月23日被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.13376。本发明的间型弯孢菌，可用作玉米和棉花等作物田间的微生物除草剂制备。本发明还提供了一种除草剂，该除草剂成分简单，环境友好，施用简单，杀草谱广，在对玉米和棉花等作物无害的前提下，对马唐、牛筋草、千金子、狗尾草、鳢肠和马齿苋等杂草的防治效果达到了75％以上，除草效果见效快，是一种可长期投入使用的生物除草剂。

技术领域

本发明属于微生物工程和除草技术领域，尤其涉及一种间型弯孢菌菌株及其应用和除草剂。

背景技术

马唐(Digitaria sanguinalis)是世界公认的18种恶性杂草之一，主要危害棉花、玉米、高粱、大豆、烟草、花生等作物，在果园、蔬菜、草坪和园艺作物田中也常有发生。马唐广泛分布于世界热带和温带地区，具有很强的繁殖能力和抗逆性，生长速度快且生长周期长。对马唐的防除主要依赖化学方法，但化学除草剂的长期大量使用将造成环境污染和残毒药害，还会导致杂草抗药性的产生。因此，亟需探寻针对马唐以及抗药性马唐的非化学防除方法。

生物除草剂具备对目标杂草致病性强的特点，同时对环境安全，其研究与开发愈来愈受到重视。目前，全球已经成功商业化或正式获得登记的生物除草剂产品有Biochon、StumpOut、Camperico、双丙氨膦钠和Myco-Tech Paste等20余个品种。其中在马唐研究方面，中隔弯孢霉(Curvularia intermedia)菌株被筛选出具有较强的致病力，已申请了专利；黑粉菌(Ustilago syntherismae)也被报道防除效果良好；另外我国有报道分离到画眉草弯孢霉(Curvularia eragrostidis)具有发展成为防除马唐的真菌除草剂的潜力。然而这些菌株杀草谱不够广泛，发酵工艺复杂，不利于推广应用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，克服以上背景技术中提到的不足和缺陷，提供一种克服马唐抗药性的间型弯孢菌，具体为一种间型弯孢菌菌株及其应用和除草剂。

为解决上述技术问题，从湖南地区棉花田自然发病的马唐中分离、筛选得到1株具有强致病力的菌株，从形态学和分子生物学方面对其进行了鉴定，同时对其生物防治效果和作物安全性进行了评估，旨在为马唐真菌除草剂的研发提供依据，解决湖南棉田马唐的抗药性问题。本发明提出的技术方案为提供一种间型弯孢菌菌株，所述间型弯孢菌(Curvularia intermedia)菌株命名为mt-3，其于2016年12月23日被保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.13376。

本发明的间型弯孢菌，是一种马唐致病菌，寄主范围广，寄主范围包括马唐、牛筋草、千金子、狗尾草、鳢肠和马齿苋等，对玉米和棉花等作物无害，可用作玉米和棉花等作物田间的微生物除草剂制备。间型弯孢菌(Curvularia intermedia)mt-3与背景技术提到的这些菌株比较，杀草谱更广泛，对马唐、牛筋草、旱稗、马齿苋等杂草均有防治效果，适合用于棉花田除草；另外，具有发酵工艺简单，制剂配方成熟，有推广应用前景。

上述的间型弯孢菌菌株的分离方法，包括如下步骤：

(1)从马唐自然发病的叶片病健交界处剪取组织块，于质量浓度为0.1％的氯化汞溶液中进行表面消毒3min，用无菌水冲洗3次；

(2)将所述步骤(1)冲洗后得到的组织块置于PDA培养基上进行恒温培养，恒温培养的温度为28℃；

(3)待所述步骤(2)恒温培养长出菌落后，从菌落边缘挑取菌丝，移入新的PDA培养基上培养，经过分离纯化得到所述的间型弯孢菌菌株。