[发明专利]TCRab和CD45RA阳性细胞耗尽的细胞组合物

说明书

本发明涉及从来源于骨髓或血液的样品制备细胞群的方法，其包括以下步骤：a)将样品分成含有50‑99%的样品细胞的第一部分和含有50‑1%的样品细胞的第二部分，b)用针对TCR α/β的第一标志物标记第一部分的细胞，c)用针对CD45RA的第二标志物标记第二部分的细胞，d)从第一和第二部分中除去标记的细胞，并将剩余的细胞合并成细胞群。此外，本发明涉及细胞组合物和细胞组合物的用途。

技术领域

本发明涉及：可从骨髓或血液获得的细胞组合物，其中细胞群耗尽了TCR α/β阳性细胞和CD45RA阳性细胞；提供所述细胞组合物的方法及其用途。

背景技术

干细胞移植越来越多地用于治疗血液学、肿瘤学、免疫学和遗传学疾病。通常，干细胞从骨髓或者在白细胞分离术(leukapheresis)后处理的动员血液(mobilized blood)中提取。

取决于供体，干细胞移植仍然遭受源自移植物对受体的反应(移植物抗宿主病，GvHD或GvHR)的并发症。其它常见的并发症包括移植的干细胞植入失败、调理步骤的毒性或由于免疫重建延长或不完全导致的治疗下的感染。

为了避免并发症并为给定的受体定制干细胞移植物，已知从起始细胞组合物富集和/或耗尽某些细胞亚群。在这方面，现有技术中描述了几种耗尽和/或富集策略。特别地，CD34+细胞的富集和CD3+细胞的耗尽是该领域中的已知方法。

在US20140308250A1公开的另一种方法中，可从骨髓或血液获得的细胞群耗尽了TCR α/β阳性细胞，同时耗尽了CD19阳性细胞。如此获得的细胞群可用于在干细胞或骨髓移植后重建人的造血系统。该细胞群包含另外的免疫细胞，例如，天然杀伤细胞、γ/δ T细胞、树突细胞、单核细胞。这些细胞群具有抗肿瘤和/或抗病毒作用，或者有助于干细胞的植入。然而，通过US20140308250A1中公开的方法获得的细胞组合物不含有病原体特异性T细胞，后者可比单独的NK细胞和γ/δ T细胞更有效地解决感染。

已知在病毒抗原遭遇时基于细胞因子分泌从单独的细胞样品分离病毒特异性T细胞。该方法昂贵、耗时且产生受限于对抗用于加工的抗原的反应性的低细胞数量。

本发明的目的是提供方法和细胞组合物，其适于通过耗尽TCR α/β和CD45RA阳性细胞重建造血系统，但除了NK细胞、TCRγ/δ T细胞、B细胞和血液树突细胞之外仍含有记忆T细胞。

尽管本发明的主要应用在干细胞移植中，但是本发明还可以用于其它临床背景，包括过继性细胞疗法，例如供体淋巴细胞输注，用于治疗感染、混合嵌合状态(mixedchimerism)和癌症复发。

发明内容

本发明的第一个方面是从来源于骨髓或血液的样品制备细胞群的方法，其包括以下步骤：a)将样品分成含有50-99%的样品细胞的第一部分和含有50-1%的样品细胞的第二部分，b)用针对TCR α/β的第一标志物标记第一部分的细胞，c)用针对CD45RA的第二标志物标记第二部分的细胞，d)从第一和第二部分中除去标记的细胞，并将剩余的细胞合并成细胞群。

本发明的另一目的是一种药物组合物，其包含可从骨髓、全血或处理过的血液获得的细胞群，其中所述细胞群耗尽了TCR α/β阳性细胞和CD45RA阳性细胞达0.1至7.0 log。

本发明的又一个目的是所述药物组合物用于在干细胞或骨髓移植后重建人的造血系统，或用于以过继性细胞转移的形式预防和治疗感染、混合嵌合状态或癌症复发的用途或使用方法。

附图说明

参考以下附图来描述各种示例性细节，其中：

图1显示了对于白细胞分离术、TCRab耗尽部分和混合物95:5 (TCRab耗尽:CD45RA耗尽)，CD4+和CD8+ T细胞的IFNγ产生，对于每种样品减去阴性对照。