[发明专利]板栗抗癌活性多糖及其分离纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及天然药物领域，具体而言，涉及一种板栗抗癌活性多糖及其分离纯化方法。

背景技术

板栗，是一种具有较高的食用及药用价值的坚果类食品。板栗是民间常用的中草药，它具有补肾强筋、养胃健脾、活血止血等功效，并且，可以治疗腰脚软弱、折伤肿痛、反胃、泄泻、凛痈等常见症状。此外，最近几年的研究表明，板栗还具多种生理功能，如：提高免疫力、抗凝血、抗疲劳、抗衰老、降血压和降血糖等。

现代药理研究表明，板栗多糖具有一定的还原能力，对脂质体氧化、Fenton反应产生的羟自由基和NO自由基均具有一定的消除或抑制作用，而且多糖浓度越高，其抗氧化活性越强。板栗多糖具有一定的清除羟基自由基、超氧阴离子自由基和过氧化氢的能力。目前，采用普通提取方法所得的板栗多糖，纯度较低，功效欠佳，不利于进一步开发成产品。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种板栗抗癌活性多糖的分离纯化方法，采用透析法和柱层析法相结合的方式，将板栗粗多糖中的小分子物质去除，所得到的产品中板栗多糖含量高。

本发明的第二目的在于提供一种由上述方法制备的板栗抗癌活性多糖，这种板栗多糖中活性成分的含量高，抗癌作用显著。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种板栗抗癌活性多糖的分离纯化方法，其包括：

以溶剂提取法得到板栗粗多糖，将板栗粗多糖溶液转移至透析袋中进行透析，得板栗多糖透析物；以及用柱层析法分离所述板栗多糖透析物，以去离子水为洗脱剂，洗脱剂流速为25～35mL/h。

一种由上述分离纯化方法所制得的板栗抗癌活性多糖。

与现有技术相比，本发明的有益效果例如包括：

本发明提供的板栗多糖制备方法，通过透析法，去除分子量小于7000的小分子物质，使得板栗多糖的纯度提高；再结合柱层析法，进一步去除板栗多糖透析物中的非多糖物质，使得最后所得产物中板栗多糖的纯度得到进一步的提高。发明人研究发现，板栗多糖对多种癌症的癌变细胞系均表现出较强的抑制活性，能够有效抑制其相关癌变细胞的增殖。因此，本发明所制得的板栗多糖，抗癌作用显著，可作为广谱的抗癌活性物质，用来制备治疗癌症的药物。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，以下将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍。

图1为实验例2中Sevage法处理次数与多糖损失率、蛋白质去除率关系；

图2为实验例2中活性炭、双氧水、大孔树脂AB-8三种脱色方法的多糖损失率和脱色率的比较；

图3为实验例2中板栗多糖DEAE-52纤维素柱层析洗脱曲线。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。

本实施方式提供一种板栗多糖的分离纯化制备方法，其包括：

步骤S1:采用溶剂提取法制备板栗粗多糖。

较为优选的，将过40～60目筛的板栗粉末与提取溶剂混合，采用溶剂提取法进行提取，将所得的提取液进行浓缩、沉淀，制得板栗粗多糖。

其中，溶剂提取法包括：索氏提取法、热水提取法、酸碱提取法、加压溶剂萃取法、酶辅助提取法、微波提取法、超声提取法、超临界萃取法等。通过上述提取方法从板栗中提取得到板栗粗多糖溶液。

进一步的，当溶剂提取法为加压溶剂萃取法时，其包括：将板栗粉末与硅藻土混合装入萃取容器，以去离子水为萃取溶剂于温度为50～80℃、压力为3～9MPa下萃取4～12min，循环2～4次。

进一步的，当溶剂提取法为超声波提取法时，其包括：将板栗粉末与水混合，在功率为500～1000W、温度为20～50℃下超声0.5～1h，循环1～3次。

进一步的，溶剂提取法为微波提取法，其包括：将所述板栗粉末与水混合，于微波容器内提取，提取功率500～1000W，提取0.5～1min后离心。

进一步的，溶剂提取法为浸提法，其包括：将所述板栗粉末与提取溶剂混合，于40～80℃下浸提，提取0.5～2h后离心。其中，提取溶剂为水、或者酸水，较为优选的，酸水为盐酸水溶液，更进一步的，盐酸水溶液的浓度为0.5-1mol/L。