[发明专利]一种从银杏叶中提取的银杏内酯化合物及其制备方法

权利要求书

1.一种从银杏叶中提取的银杏内酯化合物的制备方法，其特征在于，所述银杏内酯化合物从银杏叶中提取得到，所述银杏内酯化合物含量≥99％，所述银杏内酯化合物命名为银杏内酯HK，其结构式为：

所述制备方法包括以下步骤：

(1)用乙醇水溶液回流提取银杏叶三次，乙醇水溶液用量为5～8倍药材重量，减压浓缩提取液至无乙醇味，加水静置澄清后，过滤，滤液上大孔吸附树脂，洗脱浓缩得到银杏叶提取物；

(2)取银杏叶提取物加水溶解，加入乙酸乙酯或乙酸甲酯或二者的混合溶液进行萃取，合并萃取液，减压浓缩至干，即得银杏总内酯提取物；

(3)银杏总内酯提取物用溶剂加热溶解，再冷却静置析晶，抽滤，滤饼用溶剂洗涤后，烘干得银杏总内酯粗品；

(4)银杏总内酯粗品用有机溶剂乙酸乙酯、乙酸甲酯或二者的混合溶液，加热回流至完全溶解，减压浓缩至有结晶析出，静置析晶，抽滤，滤液浓缩至干得到银杏内酯化合物，即银杏内酯化合物粗品；

(5)将银杏内酯化合物粗品进行反相柱色谱柱纯化1～2次，流动相为甲醇和水混合溶液，甲醇比例范围为10％～90％，等度洗脱或梯度洗脱，使用紫外检测波长为220nm，收集银杏内酯化合物流出液，减压浓缩至无溶剂，干燥，得到银杏内酯化合物；所述步骤(1)、(2)、(4)减压浓缩的压力为-0.08～-0.1MPa；所述银杏内酯化合物为银杏内酯HK。

2.根据权利要求1所述一种从银杏叶中提取的银杏内酯化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)乙醇水溶液浓度为50％～80％。

3.根据权利要求1所述一种从银杏叶中提取的银杏内酯化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)水溶解银杏叶提取物的量为3～5倍银杏叶提取物重量,萃取所用有机溶剂为乙酸乙酯、乙酸甲酯或二者的混合溶液，萃取体积为0.5～1.5倍药液体积，萃取次数为1～4次。

4.根据权利要求3所述一种从银杏叶中提取的银杏内酯化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)水溶解银杏叶提取物的量为3～5倍银杏叶提取物重量,萃取所用有机溶剂为乙酸乙酯、乙酸甲酯或二者的混合溶液，萃取体积为0.8～1.2倍药液体积，萃取次数为3次。

5.根据权利要求1所述一种从银杏叶中提取的银杏内酯化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中溶解银杏总内酯提取物所用的溶剂为30％～60％含水甲醇或含水乙醇，用量为银杏总内酯提取物0.5～1.5倍重量，加热至60℃溶解，冷却静置析晶时间为8～16h，静置析晶温度为0～10℃，所用洗晶溶剂为30％～60％的含水甲醇或乙醇，洗晶次数为1～4次；烘干温度55-65℃。

6.根据权利要求5所述一种从银杏叶中提取的银杏内酯化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中溶解银杏总内酯提取物所用的溶剂为30％～60％含水甲醇或含水乙醇，用量为银杏总内酯提取物0.8～1.2倍重量，加热至60℃溶解，冷却静置析晶时间为8～16h，静置析晶温度为3～5℃，所用洗晶溶剂为30％～60％的含水甲醇或乙醇，洗晶次数为1～2次；烘干温度55-65℃。

7.根据权利要求1所述一种从银杏叶中提取的银杏内酯化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中溶解银杏总内酯粗品所用的溶剂为乙酸乙酯、乙酸甲酯或二者的混合溶液，减压浓缩至药液重量与银杏总内酯粗品重量比为10：1～15：1，反复操作次数为1～2次。

8.根据权利要求5所述一种从银杏叶中提取的银杏内酯化合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(5)中运用柱色谱法进行银杏内酯化合物的纯化，所用柱色谱填料为RP-18，流动相为甲醇和水混合溶液，甲醇比例范围为10％～90％，等度洗脱或梯度洗脱。