[发明专利]含CdSe量子点的细菌荧光探针对水和血浆中铜离子的高选择性检测方法

说明书

本发明公开了含CdSe量子点的细菌荧光探针对水和血浆中铜离子的高选择性检测方法，包括以下步骤：S01，合成CdSe量子点的2倍浓度浓缩的酵母菌悬液；S02，绘制细菌荧光探针对水中Cu²⁺的荧光猝灭效应标准曲线。本发明使用细菌合成CdSe量子点测定水中和血浆中的Cu²⁺，测定Cu²⁺时，CdSe量子点本身及表面修饰物可以排除其它多种杂质的干扰，利用细胞膜本身又能够排除其它某些离子、多肽、蛋白质和固形物的干扰，通过这种双重选择性的叠加，使得本法可更准确的测定Cu²⁺；本法还利用CN^‐特异性的与Cu²⁺发生配位反应，逆转其对CdSe量子点的荧光猝灭作用，利用这一特性可以提高检测Cu²⁺的准确度。

技术领域

本发明涉及一种含CdSe量子点的细菌荧光探针对水和血浆中铜离子的高选择性检测方法，属于环境监测技术领域。

背景技术

在环境检测和临床实践中，检测有毒的重金属一直具有重要意义。铜是多种生化反应中必要的微量元素，它在细胞呼吸、骨骼形成和结缔组织的形成中意义重大，它还是大量酶的辅助因子。缺铜容易导致贫血或再生障碍性贫血。然而，体内铜若含量过多易患湿疹、肾病等，甚至使中枢神经系统损伤和紊乱，引发肝豆状核变性病和神经退变病(如老年痴呆症)。根据美国研究理事会(National Research Council)的研究，成人每日建议摄取铜限度为1.5至3.0mg，儿童为1.5至2.5mg，婴儿为0.4至0.6mg。根据世界卫生组织的指导意见，铜被视为“饮用水中具有显著影响健康的成分”。因此，基于其重要的生理影响，需要关注每日摄取的铜含量。

鉴别和测定环境和生物体液中的铜离子(Cu²⁺)具有重要的意义。目前，已经出现的测定Cu²⁺的方法，包括DNA酶法、比色法、电化学法和荧光检测法等。近年来，荧光检测法由于检测限低，灵敏度高的优势，受到越来越多的关注。本发明提供一种含CdSe量子点的细菌荧光探针对水和血浆中铜离子的高选择性检测方法，改法选择性高，检测灵敏度高，可操作性强，适合广泛推广应用。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种含CdSe量子点的细菌荧光探针对水和血浆中铜离子的高选择性检测方法，该法使用细菌合成CdSe量子点测定水中和血浆中的Cu²⁺，测定Cu²⁺时，CdSe量子点本身及表面修饰物可以排除其它多种无机盐、脂类物质和核酸的干扰，利用细胞膜本身又能够排除其它某些离子、多肽、蛋白质和固形物的干扰，通过这种双重选择性的叠加，使得本法可更准确的测定Cu²⁺；另外，本法还利用CN^-特异性的与Cu²⁺发生配位反应，逆转其对CdSe量子点的荧光猝灭作用，利用这一特性可以显著提高检测Cu²⁺的准确度。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：

含CdSe量子点的细菌荧光探针对水和血浆中铜离子的高选择性检测方法，包括以下步骤：

S01，合成CdSe量子点的酵母菌悬液，即含CdSe量子点的细菌荧光探针；

S02，绘制细菌荧光探针对水中Cu²⁺的荧光猝灭效应标准曲线；

当1≤Cu²⁺浓度≤10μmol/L时，回归方程为I₀/I＝0.023C_Cu+1.0109，其线性相关系数为0.9943，检测限为1μmol/L；