[发明专利]HPLC测定清喉利咽颗粒中柚皮苷含量的方法

说明书

技术领域

本发明涉及测定清喉利咽颗粒中柚皮苷含量的方法，尤其涉及一种HPLC测定清喉利咽颗粒中柚皮苷含量的方法。

背景技术

清喉利咽颗粒是由黄芩、西青果、桔梗、竹茹、枳壳、胖大海、橘红等13种中药组成。具有清热利咽，宽胸润喉的功效。用于外感风热所致的咽喉发干、声音嘶哑；急慢性咽炎、扁桃体炎见上述证候者，常用有保护声带作用。

发明内容

本发明的目的旨在提供一种HPLC测定清喉利咽颗粒中柚皮苷含量的方法。

本发明的目的通过以下技术方案来实现：一种HPLC测定清喉利咽颗粒中柚皮苷含量的方法，包括以下步骤：

(1)制备对照品溶液：取柚皮苷对照品与甲醇制成对照品溶液；

(2)制备待测样品溶液：精密取清喉利咽颗粒样品加甲醇稀释，制得待测样品溶液；

(3)取对照品溶液注入高效液相色谱仪测定，建立柚皮苷标准曲线；

(4)取待测样品溶液注入高效液相色谱仪测定，获得柚皮苷的峰面积，从而根据标准曲线获得柚皮苷含量；

所述步骤(3)和(4)的色谱条件：250mm×4.6mm，4μm，Phenomenex C18色谱柱；流动相：甲醇-水＝50:50；流速1.0mL/min；波长：283nm，柱温：30℃，进样量10μl。

所述步骤(1)中，精密称取柚皮苷17.6mg、置50量瓶中加甲醇使溶解，并稀释至刻度，作为对照品储备液，精密吸取对照品储备液12.5ml置25ml瓶中加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液。

所述步骤(2)中，精密量称取清喉利咽颗粒2g，置50ml量瓶中，加甲醇45ml超声提取30min，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得待测样品溶液。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

与现有技术相比，本发明提供的方法操作简单，高效省时，鉴定结果客观准确。

具体实施方式

实施例1

(1)制备对照品溶液：精密称取柚皮苷17.6mg、置50量瓶中加甲醇使溶解，并稀释至刻度，作为对照品储备液(浓度：柚皮苷：352μg·mL^-1)，精密吸取对照品储备液12.5ml置25ml瓶中加甲醇稀释至刻度，作为对照品溶液(浓度：柚皮苷：176μg·mL^-1)

(2)制备待测样品溶液：精密量称取清喉利咽颗粒2g，置50ml量瓶中，加甲醇45ml超声提取30min，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得待测样品溶液。

(3)分别精密吸取对照品溶液2、5、10、15、20μl注入高效液相色谱仪测定，以柚皮苷峰面积积分值为纵坐标(Y)，对照品进样量(ng)为横坐标(X)绘制标准曲线，得柚皮苷的回归方程为：Y＝42.6X+8.6(r＝0.9998)。

色谱条件：250mm×4.6mm，4μm，Phenomenex C18色谱柱；流动相：甲醇-水＝50:50；流速1.0mL/min；波长：283nm，柱温：30℃，进样量10μl。

(4)取待测样品溶液注入高效液相色谱仪进行测定，获得柚皮苷峰面积，根据回归方程计算得到柚皮苷的含量。取不同批号的清喉利咽颗粒样品3批分别进行测定，柚皮苷含量分别为：3.79mg/g、3.80mg/g、3.82mg/g。

本发明可用其他的不违背本发明的精神或主要特征的具体形式来概述。本发明的上述实施方案都只能认为是对本发明的说明而不是限制，因此凡是依据本发明的实质技术对以上实施例所作的任何细微修改、等同变化与修饰，均属于本发明技术方案的范围内。