[发明专利]用于软骨修复的生物组合制剂及其应用

说明书

本发明涉及一种用于软骨修复的生物组合制剂和应用。该生物组合制剂包括体积比为10～15∶1～10的尿液再生细胞的生理盐水混悬液与水凝胶；其中，所述尿液再生细胞的生理盐水混悬液中，尿液再生细胞的含量为1×107～5×107个/mL；所述水凝胶为壳聚糖基水凝胶。该生物组合制剂能够适用于组织工程学技术进行软骨修复，且对软骨损伤的修复效果好，治疗省时、显效快。

技术领域

本发明涉及生物制剂，特别是涉及用于软骨修复的生物组合制剂及其应用。

背景技术

关节软骨损伤是引起关节疼痛或不适的关键因素，因软骨组织无血运供应，自愈能力非常有限，导致了疼痛的进行性加重及早期关节炎的发生。

目前已有多种治疗关节软骨损伤的方法，根据目的可分为非软骨修复型治疗和软骨修复型治疗两类。非软骨修复型治疗方法中，对于症状较轻的患者，有口服氨基葡萄糖；关节腔内注射玻璃酸钠、糖皮质激素药物；红外线治疗等治疗方法。均能达到缓解疼痛、延缓退行性病变的目的，但这些方法并未能从根本上解决引起疼痛的病因，随着时间的推移，软骨损伤仍会持续加重。然而，当关节软骨损伤较为严重时，解决患者疼痛的唯一方法是通过手术行人工关节置换，通过使用生物相容性及机械性能良好的金属假体置换关节面，以达到消除疼痛、切除病灶、恢复关节活动的目的。但该方法有相应的适应症和并发症，并不适合每一位软骨损伤的患者。

软骨修复型治疗方法中，包括微骨折技术、组织工程学技术、软骨及骨膜移植技术、基因治疗技术。其中微骨折技术是利用在软骨缺损区打孔释放的骨髓间充质干细胞、生长因子等形成显微血凝块，分化为纤维软骨组织，促进软骨再生。但临床观察发现，该技术进行修复的软骨其韧性和弹性均较透明软骨差。组织工程修复软骨需要具备足够数量的种子细胞，维持细胞表型特征的细胞因子，以及具备良好生物相容性、可无毒降解和孔隙率合适的三维支架。而种子细胞的选择中，脂肪干细胞、间充质干细胞和胚胎干细胞在促进软骨分化能力上已得到证实，但由于取材、培养技术及伦理方面等问题，未能得到广泛运用。自体软骨移植有利有弊，优点是不存在免疫排斥反应，缺点是低分化、低生物活性，且获取软骨细胞属于有创操作，易引起感染、术后疼痛等并发症，主要用于中小面积的软骨损伤。反之，异体骨膜移植来源充足，可修复较大面积的软骨损伤，但容易发免疫排斥反应。两种方法均限制了临床应用。基因治疗技术在软骨损伤中的应用目前仍停留在理论层面，基因的提取生和转染并在临床上成熟应用仍然在探索中。

发明内容

基于此，有必要提供一种用于软骨修复的生物组合制剂，该生物组合制剂能够适用于组织工程学技术进行软骨修复，且对软骨损伤的修复效果好，治疗省时、显效快。

一种用于软骨修复的生物组合制剂，包括体积比为10～15∶1～10的尿液再生细胞的生理盐水混悬液与水凝胶；

其中，所述尿液再生细胞的生理盐水混悬液中，尿液再生细胞的含量为1×107～5×107个/mL；

所述水凝胶为壳聚糖基水凝胶。

在其中一个实施例中，所述尿液再生细胞的生理盐水混悬液与水凝胶的体积比为10～12∶4～6；所述尿液再生细胞的生理盐水混悬液中，尿液再生细胞的含量为2×107～4×107个/mL。

在其中一个实施例中，所述水凝胶为温敏性氯化壳聚糖/β-甘油磷酸钠基水凝胶。

在其中一个实施例中，所述水凝胶以氯化壳聚糖和β-甘油磷酸钠为原料，乙基纤维素为交联剂配制而成。

在其中一个实施例中，所述水凝胶的制备方法，包括如下步骤：

将氯化壳聚糖配制为1～5％w/v的氯化壳聚糖水溶液；