[发明专利]一种应用于水体蓝藻的预防和抑制方法

权利要求书

1.一种应用于水体蓝藻的预防和抑制方法，其特征在于：包括以下步骤，

步骤1、首先确定施加生物活性菌菌剂制品的水域，再利用喷洒机械将生物活性菌菌剂均匀施加在待处理水域，其中，生物活性菌菌剂是以枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、施氏假单胞菌（Pseudomonas stutzeri）、水生假丝酵母（Candida aquatica）为菌种，采用有机、无机原料，将各菌种单独发酵后复合配制而成；

步骤2、对待处理水域进行监控，7-8小时后，再在待处理水域通过喷洒机械施加小球藻溶液，其中，小球藻溶液的小球藻含量为3～8×10⁷ cfu/ml、pH 值为6.5-9.5；

步骤3、对喷洒小球藻溶液的水域进行监控，6-7小时后，依据监控检测的蓝藻状态，重复步骤1、步骤2的处理步骤。

2.根据权利要求1所述的一种应用于水体蓝藻的预防和抑制方法，其特征在于：所述步骤1中的生物活性菌菌剂，有效活菌总数（含枯草芽孢杆菌、施氏假单胞菌、水生假丝酵母）≥2×10⁸ 个/mL，芽孢杆菌数≥1×10⁸ 个/mL，其中，有效活菌含枯草芽孢杆菌、施氏假单胞菌、水生假丝酵母。

3.根据权利要求1或2所述的一种应用于水体蓝藻的预防和抑制方法，其特征在于：所述步骤1中生物活性菌菌剂的pH为4-6.5，霉菌杂菌的总数为≤3.0×10⁵ cfu/ml，大肠菌群为≤10 MPN/100mL；所述步骤1中生物活性菌菌剂喷洒时，需要对菌剂的有效活菌数进行测定，包括以下步骤，

a、以无菌操作将充分混匀的检样25mL放入含有225mL灭菌生物盐水的灭菌锥形瓶内作成1：10的均匀稀释液；

b、用1mL灭菌吸管吸取1：10稀释液1mL，沿管壁徐徐注入含有9mL 灭菌生理盐水的试管内，振摇混匀，做成 1：100的稀释液；

c、另取1mL灭菌吸管，按上述操作顺序，做10 倍递增稀释液，如此每递增一次，即换用1支1mL灭菌吸管；

d、选择 1：10^-7、1：10^-8两个适宜稀释度，各取 1mL 分别加入计数培养基平皿，每个稀释度做三个平皿；

e、稀释液移入平皿中，应及时将冷至45℃的计数培养基注入平皿约15mL-20mL，并转动平皿使混合均匀，同时将计数培养基倾入加有1mL稀释液检样用的灭菌生理盐水的灭菌平皿内作空白对照，枯草芽孢杆菌、施氏假单胞菌使用葡萄糖培养基培养，水生假丝酵母使用淀粉培养基培养；

f、待琼脂完全凝固后，翻转平板，置 32℃±1℃温箱内培养48h±2h，选取菌落数在 30-300之间的平板进行计数；

g、菌数计算，根据每一稀释度采用三个平板菌落的平均数，然后乘以样品的稀释倍数，得每毫升样品中活菌数；如有两个稀释度，其生长的菌落均在30-300之间，视两者之比如何来决定，如其比值小于2，应报告其平均数；如大于2，则报告其中较小的数字。

4.根据权利要求1所述的一种应用于水体蓝藻的预防和抑制方法，其特征在于：所述步骤1中生物活性菌菌剂喷洒时，需要对菌剂的有效活菌数进行测定，包括以下步骤，

a、先将用于培养菌种的液体培养基倒入10 mm比色杯中，选用600nm波长分光光度计上调节零点，作为空白对照；

b、再将检样300 mL放入灭菌广口瓶，上下剧烈振摇30次-40次，用灭菌吸管吸出注入10mm比色杯中，测定600nm波长下的光密度值。

5.根据权利要求3所述的一种应用于水体蓝藻的预防和抑制方法，其特征在于：所述步骤1中淀粉培养基的成分为淀粉20g、硝酸钾1.0g、磷酸氢二钾0.5g、氯化钠0.5g、硫酸镁0.5g、硫酸铁0.01g，混合后加蒸馏水至1000mL，pH7.2±0.1，首先将以上所有成分加入蒸馏水中，按2%添加琼脂，再加热溶解，校正pH 7.2±0.1，最后分装、高压灭菌121℃，时间为15min-20min，使用时加热熔化琼脂，冷却至45℃时使用。