[发明专利]一种桃、李、杏等核果类果树果实种子的消毒方法

说明书

技术领域

本发明涉及组织培养技术领域，特别是一种桃、李、杏等核果类果树果实种子的消毒方法。

背景技术

一些核果类果树如桃、杏、李等的早熟品种、特早熟品种在调剂市场余缺，保证水果的周年供应等方面发挥了重要作用，但这些早熟、特早熟品种，果实发育期往往不足60-70天(桃、李、杏)，由于果实发育时期太短，种胚发育不全，难以发育成熟，采用常规播种不能成苗或萌芽率很低，这是核果类果树早熟品种育种的一大障碍。胚培养技术解决了品种杂交过程中胚的败育问题，给核果类果树早熟品种的培育提供了有效途径，在解决其育种周期长、育种效率低而造成的品种改良难等方面显示了巨大的潜力，已成为果树育种改良的重要手段之一。

常规操作方法是摘取杂交果实，削去果肉，砸破果核，取出种子，用流水冲洗干净后，用少量洗衣分水浸泡10分钟后，流水冲洗30分钟，超净工作台上用75%酒精中处理30秒，无菌水冲洗一次，再用0.1%升汞溶液消毒8-12分钟，最后用无菌水冲洗3-5次后在无菌滤纸上拭干，进行直接接种。

实际使用中存在以下问题：1、步骤繁杂，整个过程需要1个多小时的时间，且步骤较多，不易掌握。2、这种方法由于处理时间长，只能批量操作，如一次性处理30-50粒种子，但这样会造成一定的风险，就是在这30-50粒种子中，如果有一粒种子中，已经产生了内生困菌，将造成这30-50粒种子最终全部污染，前功尽弃。3、升汞是一种剧毒污染物质，使用后的溶液处理不当，会对环境甚至人身安全造成危害。

发明内容

本发明解决现有技术不足提供一种成本低廉、操作简单、萌芽率高、污染率低的桃、李、杏种子胚培养过程中的消毒处理方法。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案为：

一种桃、李、杏等核果类果树果实种子的消毒方法，包括如下步骤：

A、清洗果实

采摘新鲜果实，清水冲洗新鲜果实表面；

B、取出种子

将果肉去除，打开种壳用无菌镊取出种子；

C、酒精消毒

种子蘸入体积浓度95%的酒精；

D、点燃消毒

点燃种子外层酒精进行消毒，待种子火苗自然熄灭；

E、去除种皮

火苗熄灭后，用无菌手术刀片去除种皮。

所述步骤B、C、D和E在超净工作台上进行操作。

所述步骤D中种子的种胚端迎风点燃。

所述步骤D中迎风风速为3-6m/s。

所述步骤E中火苗熄灭后使用无菌手术刀片将种皮去除。

所述步骤E中从种子的远胚端切去五分之一部分，用镊子挤压使种子从种皮中挤出。

本发明的有益效果为：

1、本发明的一种桃、李、杏等核果类果树果实种子胚培养过程中的的消毒方法，蘸取酒精，避免杂质和细菌影响，通过点燃酒精高温杀死细菌。减少化学消毒试剂使用量。种子逐个蘸取酒精消毒操作，避免交叉污染，有效降低污染率。

2、取出种子后迅速蘸取酒精，取出种子在表面迅速形成酒精包裹层。防止新取出种子沾染杂菌。并点燃酒精包裹层，通过高温杀死种子外层细菌。同时通过高温使得种子外层脱水形成灼烧保护层。灼烧保护层具有隔离保护内芯功能。此外，种皮外层灼烧后失水20-30%，内外层柔韧程度不同，更易去除外层种皮。迎风风速越大失水率越低，根据种子外皮的含水率通过风速调节控制外层含水率，便于培养时分离外层种皮。

3、种子的种胚端迎风点燃，通过微风吹拂防止种胚端湿度过高而灼烧种胚至其死亡。提升后期萌发率。

本发明利用酒精燃烧时的瞬时高温进行种子表面消毒，又不伤害里层种胚，安全高效，降低升汞Agcl₂等消毒物质使用，解决升汞Agcl₂消毒时间和浓度不易掌握的问题，大幅减低消毒操作难度。种子逐个蘸取酒精消毒操作，避免交叉污染。单种子消毒操作在30秒之内完成，快速简便易于操作。

具体实施方式

一种桃、李、杏等核果类果树果实种子的消毒方法，包括如下步骤：

A、清洗果实

采摘新鲜果实，清水冲洗新鲜果实表面；

B、取出种子

将果肉去除，打开种壳用无菌镊取出种子；

C、酒精消毒

种子蘸入体积浓度95%的酒精；

D、点燃消毒

点燃种子外层酒精进行消毒，待种子火苗自然熄灭；

E、去除种皮

火苗熄灭后将种皮去除。