[发明专利]一种激活PTPRO基因表达的saRNA及其在肿瘤干细胞治疗中的应用

说明书

本发明公开了一种激活PTPRO基因表达的saRNA，所述saRNA包括与PTPRO基因启动子区‑3000至‑200位点区域互补的核苷酸序列。本发明还公开了saRNA和c‑Met抑制剂的联合使用在制备用于治疗肿瘤的药物中的用途。本发明的靶向PTPRO基因的saRNA和c‑met抑制剂联合使用可显著抑制肿瘤细胞干性，抑制肿瘤细胞生长，而且可显著提高受体酪氨酸激酶c‑met抑制剂疗效，说明saPTPRO和c‑met抑制剂二者联合使用具有协同增加抑制肿瘤细胞生长的作用。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其是靶向PTPRO基因的saRNA在肿瘤干细 胞治疗中的应用。

背景技术

肿瘤干细胞(cancer stem cells，CSCs)是肿瘤细胞中存在的小部分具有无限 增殖、自我更新和多向分化潜能的细胞亚群，是肿瘤形成、复发、恶性转移和 耐受放化疗性的细胞学根源。肿瘤干细胞的相关研究为肿瘤的治疗提供了新的 思路，肿瘤干细胞靶向治疗可能成为肿瘤根治的希望。目前，针对CSCs的特点， 有以下几种靶向肿瘤干细胞的治疗方法：①针对肿瘤干细胞表面标志物的靶向 治疗；②针对肿瘤干细胞信号传导通路的靶向治疗；③通过对肿瘤干细胞的诱 导分化实现靶向治疗；④针对肿瘤干细胞微环境的靶向治疗；⑤靶向肿瘤干细 胞的免疫疗法；⑥针对肿瘤干细胞耐药机制的靶向治疗；⑦针对肿瘤干细胞端 粒末端转移酶的靶向治疗；⑧针对CSCs的特定基因的靶向治疗；⑨通过微小 RNA实现靶向治疗。由于传统的肿瘤治疗方法不能有效杀灭CSCs,因此,开发针 对CSCs的靶向治疗将有助于提高恶性肿瘤疗效,对肿瘤复发、转移、耐药等具 有重要意义。

原癌基因肝细胞生长因子受体c-Met的编码产物是肝细胞生长因子 (hepatocytegrowth factor，HGF)的细胞膜受体，属酪氨酸激酶受体，当HGF与 c-Met结合后，会导致一系列信号途径的激活，从而引起肿瘤干性、血管生成、 增殖、细胞运动性增强和侵袭，最终发生转移，因而与人类多种肿瘤的发生、 发展有关。大量研究显示很多人类恶性肿瘤都与HGF/c-Met信号通路密切相关， 主要是通过以下几种机制：特定的基因缺陷，包括基因易位、基因拷贝数增加、 激活突变；非基因拷贝数增加的c-MET转录水平的上调；配体依赖的旁分泌或 自分泌机制；与其他信号通路相互作用或者促进血管生成等。其中，HGF/c-Met通路对肿瘤干性有重要作用。最近的一项研究表明，c-Met通路对维持结肠癌组 织中的结肠癌干细胞发挥重要的作用，结肠癌组织中的HGF主要来源于组织 中的成纤维细胞，这些细胞分泌的HGF作用于肿瘤细胞，引起肿瘤细胞Wnt 通路的活化，从而保持了肿瘤细胞的干细胞特性。有研究也发现在乳腺癌骨转 移灶中，骨组织来源或肿瘤细胞自分泌的HGF能够启动c-Met-Src-Wnt信号轴 的激活。在非小细胞肺癌中，肿瘤组织中的c-Met和纤维组织中的HGF影响 着肿瘤的生长以及患者的预后。在多发性骨髓瘤中，c-Met和Wnt通路都存在 异常激活现象，而阻断任一通路都能够有效抑制肿瘤的生长。而且在近两三年 内，陆续多项研究表明，HGF/c-Met通路不仅起到调控CSCs的作用，而且 c-Met受体本身也可以作为多种类型肿瘤如脑胶质细胞瘤、胰腺癌、前列腺癌和 头颈部肿瘤的CSCs表面标志。近十年来，CSCs的理论在肿瘤研究领域前景 广阔，目前认为肿瘤中的CSCs是介导肿瘤发生耐药、转移和治疗后复发的关 键因素，加之越来越多的证据表明c-Met信号通路在CSCs调控中发挥着重要 的作用，那么针对c-Met通路的靶向治疗则为以根除CSCs为目标的肿瘤治疗 提供了新的方向。

目前针对c-Met的抑制剂有很多，包括:(1)小分子c-Met抑制剂；(2)抗 HGF和c-Met抗体；(3)c-Met生物性抑制剂(如核酶、多肽)；(4)c-MET配体 HGF拮抗剂。然而在治疗人类肿瘤中，上述途径仍需要得到进一步证实，其中 最可能成功的方法是小分子抑制剂和单克隆抗体。针对以c-Met为靶点的小分 子抑制剂的研发已有十几年的历史。根据其c-Met激酶区的结合形式的不同分 为ATP竞争性抑制剂和非ATP竞争性抑制剂，作用机制均是通过阻断酪氨酸 磷酸化从而抑制c-Met激酶活性。