[发明专利]以天冬酰胺为功能配基的亲和层析介质

权利要求书

1.一种以天冬酰胺为功能配基的亲和层析介质，其特征在于，包括层析基质、空间臂和配基，所述的层析基质为大孔β-环糊精微球，空间臂为6-氨基乙酸，配基为天冬酰胺。

2.一种如权利要求1所述的以天冬酰胺为功能配基的亲和层析介质的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)将层析基质抽干后，加入0.3-1倍层析基质质量的体积百分比为30％的丙酮、烯丙基氯和0.1-1倍层析基质质量的氢氧化钠，40℃下200rpm摇床中活化30-50小时，抽滤，用去离子水洗涤得到活化层析基质；

2)将活化层析基质和0.2-0.8倍活化层析基质质量的N-氯代丁二酰亚胺混合进行氯代醇化，50℃下200rpm摇床中反应2小时，抽滤，用去离子水洗涤，得到氯代醇化的层析基质；

3)将氯代醇化的层析基质和0.4-1倍氯代醇化的层析基质质量的6-氨基乙酸以及1M碳酸钠缓冲液混合，40℃下200rpm摇床中反应5-20小时，得到羧基活化基质；

4)取羧基活化基质，分别用去离子水、无水乙醇和无水N-甲基吡咯烷酮清洗，清洗后的羧基活化基质加入到含有0.5-2倍活化羧基密度的天冬酰胺、0.2-3倍活化羧基密度的2-(7-偶氮苯并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯、0.2-5倍活化羧基密度的N-异丙基甲胺的N-甲基吡咯烷酮溶液中，25℃下水浴摇床中反应4-10小时，得到天冬酰胺偶联后的介质；

5)将天冬酰胺偶联后的介质依次用无水N-甲基吡咯烷酮、丙酮和去离子水清洗，抽滤，加入到乙酸钠和乙酸酐的混合液中，25℃下水浴摇床中反应2小时，去离子水洗涤，得到以天冬酰胺为功能基团的亲和层析介质。

3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述的乙酸钠和乙酸酐的体积比为2:1。

4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述碳酸钠缓冲液的pH为10-12。

5.如权利要求1所述的以天冬酰胺为功能配基的亲和层析介质，其特征在于，所述烯丙基氯和层析基质的质量比为0.7-1.6：1。