[发明专利]一种用于冻存复苏后的细胞保存液及其用途

说明书

本发明提供了一种用于冻存复苏后的细胞保存液及其用途。本发明提供的保存液主要是由醋酸铵和人参总皂苷用浓度为40‑55mg/mL的MEM培养基水溶液溶解而成，其中醋酸铵溶解后的浓度为25‑32mg/mL，人参总皂苷溶解后的浓度为20‑28mg/mL，为冻存复苏后的细胞提供充足的养分，维持其存活率，降低其污染率，延长其冻存时间。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种用于冻存复苏后的细胞保存液及其用途。

背景技术

细胞治疗是指利用某些具有特定功能的细胞的特性，采用生物工程方法获取和/或通过体外扩增、特殊培养等处理后，使这些细胞具有增强免疫、杀死病原体和肿瘤细胞、促进组织器官再生和机体康复等治疗功效，从而达到治疗疾病的目的。

细胞治疗的治疗范围包括:慢性疾病，如慢性肾衰竭、伴随胃、胆囊、胰腺功能下降的消化障碍、慢性便秘、慢性肝衰竭、椎间盘受损、脊柱疼痛、关节提前损耗等；退行性疾病，如共济失调、小脑萎缩、帕金森、多发性硬化症等；免疫性疾病，如红斑狼疮、类风湿性关节炎、青少年糖尿病、多种皮肤病等。

细胞的种类有很多，如间充质干细胞等，而在临床移植治疗中，不能将新鲜分离的干细胞直接输注于人体内，它需要先存放在可以输注的保存液(如0.9％氯化钠注射液)中一定时间，再输注于体内。有的细胞冻存一段时间后，需要复苏才能进行使用，而冻存复苏后的细胞，细胞膜较为脆弱、细胞的抵抗力较低，此时若使用常规的保存液保存细胞，则细胞的存活率会下降，同时污染率会增加，因此，尚需提供一种用于冻存复苏后的细胞保存液，来保证冻存复苏后的细胞的存活率和活性。

发明内容

为了解决现有技术中细胞冻存复苏后在常规保存液中细胞膜脆弱导致细胞存活率低等问题，本发明提供了一种用于冻存复苏后的细胞保存液，该保存液延长了冻存复苏后的细胞的活性维持时间，降低其污染率，提高其存活率。

本发明具体技术方案如下:

本发明提供了一种用于冻存复苏后的细胞保存液，该保存液主要是由醋酸铵和人参总皂苷用浓度为40-55mg/mL的MEM培养基水溶液溶解而成，其中醋酸铵溶解后的浓度为25-32mg/mL，人参总皂苷溶解后的浓度为20-28mg/mL。

进一步的改进，该保存液主要是由醋酸铵和人参总皂苷用浓度为45mg/mL的MEM培养基水溶液溶解而成，其中醋酸铵溶解后的浓度为30mg/mL，人参总皂苷溶解后的浓度为25mg/mL。

进一步的改进，MEM培养基为L型MEM培养基。

其中，L型MEM培养基包含:200.00mg/L的无水氯化钙、97.67mg/L的硫酸镁、400.00mg/L的氯化钾、6800.00mg/L的氯化钠、115.00mg/L的无水磷酸二氢钠、126.00mg/L的L-盐酸精氨酸、31.00mg/L的L-盐酸胱氨酸、292.00mg/L的L-谷氨酰胺、42.00mg/L的L-盐酸组氨酸、52.00mg/L的L-异亮氨酸、52.00mg/L的L-亮氨酸、73.00mg/L的L-盐酸赖氨酸、15.00mg/L的L-甲硫氨酸、32.00mg/L的L-苯丙氨酸、48.00mg/L的L-苏氨酸、18.00mg/L的L-色氨酸、36.00mg/L的L-酪氨酸、46.00mg/L的L-缬氨酸、1.00mg/L的D-泛酸钙、1.00mg/L的叶酸、2.00mg/L的肌醇、1.00mg/L的烟酰胺、1.00mg/L的氯化胆碱、1.00mg/L的盐酸吡哆辛、0.10mg/L的核黄素、1.00mg/L的盐酸硫胺、1000.00mg/L的葡萄糖和10.00mg/L的酚红。

本发明通过将醋酸铵、人参总皂苷溶解于MEM培养基中，形成保存液，为细胞提供养分，进而提高细胞的存活率，延长细胞的保存时间。

进一步的改进，保存液还包含浓度为20-36mg/mL的金霉素、浓度为15-25mg/mL的头孢吡肟和浓度为10-24mg/mL的柳氮磺吡啶。