[发明专利]桑黄多糖作为一种天然TLR4激动剂在增强特异性免疫应答中的应用

说明书

本发明涉及生物医药领域，公开了桑黄多糖作为一种天然TLR4激动剂在增强特异性免疫应答中的应用，本发明首次公开了桑黄多糖作为桑黄多糖作为一种天然TLR4激动剂在增强特异性免疫应答中的应用，为寻求更安全有效的免疫佐剂提供了研究方向，同时也为桑黄多糖作为免疫佐剂进入临床提供了理论依据。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，尤其涉及桑黄多糖作为一种天然TLR4激动剂在增强特异性免疫应答中的应用。

背景技术

疫苗接种是预防和控制相应传染病的最有效的公共卫生干预措施之一，能够在一定程度上减少传染病的发病率和死亡率。随着现代生物技术的迅速发展，传统疫苗的制备工艺不断改进，重组亚蛋白疫苗、抗独特型抗体疫苗、核酸疫苗及合成肽疫苗等新型疫苗的逐步开发，疫苗中的无关成分、不良反应也随之减少，安全性大大提高，但也随之出现了抗原免疫原性普遍较弱的现象。早在1925年，法国免疫学家Gaston Ramon发现在疫苗中加入一些与疫苗本身无关的小分子物质，特异性的增加机体对白喉和破伤风毒素的免疫反应，而这种小分子物质被称为了佐剂。佐剂具有增强和调节抗原的作用, 可通过物理或化学的方式与抗原结合，使机体产生持久、高效和记忆性免疫应答。

佐剂最早来源于希腊语“adjuvare”, 具有帮助、辅助的意思。免疫佐剂本身不具抗原性，但通过和抗原预先或同时应用后，从而增强免疫原性或改变免疫反应，故又称非特异性免疫增生剂。

铝盐自1932年首次用于改善破伤风和白喉类毒素疫苗的免疫效果之后，在1939年，铝佐剂诞生，它也是首个被美国FDA批准可以用于人的经典佐剂。至今为止，铝佐剂应用于临床已有近90年的历史，目前已被批准的含铝佐剂疫苗包括DTP、无细胞百日咳疫苗DTP(DTaP)、b 型流感杆菌(HIB)疫苗(不是所有的)、乙型肝炎(HB)疫苗, 以及所有的DTaP、HIB或HB 的联合疫苗。还包括甲型肝炎疫苗、莱姆病疫苗、炭疽疫苗和狂犬病疫苗[6]。铝佐剂的作用机理包括：储存库效应，促进抗原呈递细胞( 如树突状细胞、巨噬细胞和B 细胞) 吞噬抗原，促进Th2 型免疫反应和补体激活等。将铝佐剂和疫苗一同使用，不仅能减少抗原的使用量，而且还能够增强机体免疫反应的持久性和强度。而且，丰富的临床研究也表明，铝佐剂是相对安全的。但在长期的使用过程中，铝佐剂也显现出其短处，例如不能诱导产生TH1型反应，不能诱导细胞免疫和细胞毒性T细胞应答，使得疫苗的免疫保护不全面，不持久，同时也曾产生了机体发热、注射部位的脓肿、肉芽增生，引起长时间的组织损伤等一些局部不良反应和毒副作用，在储存方面，以铝化合物为佐剂的疫苗无法冷冻保存。

脂质体佐剂一种将免疫原根据自身性质镶嵌在膜表面或包裹在膜内部的超微型球状药物载体制剂。相较于铝佐剂而言，脂质体能包封多种抗原，并在一定程度上降低抗原毒性，是能够增强机体的体液免疫应答和细胞免疫应答，利于将抗原递呈给抗原处理细胞。但由于脂质体佐剂生产成本高、稳定性差等原因限制了它的推广发展。

近些年，免疫佐剂迅速发展，除了铝佐剂、脂质体佐剂之外，蛋白质佐剂、核酸类佐剂和免疫刺激复合物佐剂等不同类型的佐剂也不断兴起。蛋白质佐剂主要是以细胞因子为主，具有明显的免疫佐剂效应, 可增强抗原特别是肿瘤抗原特异性免疫反应。但细胞因子昂贵，种属特异，稳定性差、有一定毒性及潜在的自身免疫性。而核酸类它在增强特异性免疫应答、诱导机体非特异性免疫应答以及调节免疫应答类型等方面发挥着重要的作用。而免疫佐剂复合物虽可诱导强的Th1和Th2反应, 具有良好的靶向性和呈递作用，可以通过皮下、口服等多种途径具有佐剂作用，但是它只对初次免疫机体具有较强的免疫作用，对再次免疫应答水平几乎无明显提高。

尽管目前已有的脂质体佐剂、蛋白质佐剂、核酸类佐剂和免疫刺激复合物佐剂等多种佐剂不断发展，但在较长时间内还不能替代铝盐作为免疫佐剂的主导地位，其具体作用机制和不良反应还有待深究。与此同时，寻找安全、高效新型免疫佐剂，以提高疫苗的免疫原性，减少不良反应成为了当务之急。

发明内容