[发明专利]用于电穿孔的移液管尖端

说明书

本申请涉及用于电穿孔的移液管尖端。文中提供了一种移液管尖端，所述移液管尖端包括：外表面；位于所述外表面内的空腔；和至少局部位于所述外表面上或该外表面内的导体，其中所述导体与所述空腔和所述外表面的至少一部分电连接。文中进一步提供了一种用于电穿孔的移液管尖端，所述移液管尖端包括主体、连接件和细长部分。所述连接件位于所述主体的远端并进一步包括至少一个连接柱；与所述连接件机械连接的连接部分；和至少局部位于所述连接件上或该连接件内的导体，其中所述导体包围所述连接柱的至少一部分。所述细长部分还具有空腔，并位于所述连接件的远端。所述主体、连接件和细长部分的空腔流体连通。

本申请是申请日为2009年4月15日，申请号为200980122290.4，发明名称为“用于电穿孔的移液管尖端”的申请的分案申请。

交叉引用

本申请要求2008年4月15日提交的、题为“Pipette Tip for ElectroporationDevice”的韩国申请10-2008-0034744的优先权以及利益，该申请通过引用而全文包含在本申请中。

技术领域

本发明涉及用于电穿孔的移液管尖端。

背景技术

电穿孔是利用电脉冲向细胞内引入无法穿透细胞膜的大分子的技术。电穿孔是一种广泛采用并得到强烈推荐的用于细胞试验和基因疗法的方法。在施加强电场时，细胞膜暂时变成多孔性质并且可以透过外界材料，诸如大分子。细胞膜电穿透作用取决于电场的各种参数，诸如脉宽、脉冲持续时间、脉冲数量以及其它实验条件。已经针对上述参数进行了研究，以理解促进转染效应的电穿孔作用的机制。例如，电场幅值据报道是提高细胞膜渗透性以及控制发生传输的细胞膜部分的重要参数。

目前存在用于实施电穿孔的各种设备。图1是可以用来实施电穿孔的现有试管的透视图。图2示出了相关的美国申请No.10/560,301中所述电穿孔设备和系统。图3是图2所示电穿孔设备的侧视图。图4是侧视图，示出了用于图2和3所示设备的移液管尖端的部件。

可以利用图1所示试管向细胞悬浮液和/或基因混合物施加电场。在这种系统中，试管可以装备两个平行电极板1。在这两个电极板之间施加强电场时，细胞膜变得可渗透，允许向细胞内引入基因或其它外界物质。铝电极价格低廉，并且可以用于一次性试管。但是，利用Al会产生从铝电极容溶解的Al³⁺离子，发现这种离子对于细胞存在负面影响。此外，在使用铝电极时，电场幅值可能因电极上氧化层堆积导致的电压下降而发生变化。因此，为了产生更为恒定的电场，优选使用铂电极或金电极。但是，用这些材料制成的电极成本高昂，因此利用这些材料为消费品制作电极不切实际。

因此，目前的电穿孔设备存在以下缺点。首先，使用电穿孔试管可能因所用电极材料而造价昂贵，因为需要在试管相对两侧上安装两个电极并且每个电极具有宽阔的表面积。此外，推荐单次使用试管。但是，许多使用者利用相同的试管进行若干次试验，因此造成了实验误差发生率较高。其次，由于电极材料(Al)与溶液发生反应，并且相对于产生氢的过电压较低，所以利用目前的电穿孔设备实施电穿孔会因电极表面的水发生分解而产生气泡。第三，已经发现所产生的离子(Al³⁺)副产品对细胞具有负面影响。第四，由于在电极表面上产生氧化层(Al₂O₃)，所以电极的表面阻抗显著升高。第五，电极之间的电场可能不能保持恒定。这可以归因于大量的电流流过电极的拐角，由此使得电场变形。最后，所需的样本体积可能巨大，这可能导致难于分析样本中的少量细胞。因此，需要开发一种新的电穿孔设备来应对这些问题。