[发明专利]一种虾青素含量的检测方法

说明书

技术领域

本发明属于化学分析领域，尤其涉及一种虾青素含量的检测方法。

背景技术

虾青素属于萜烯类不饱和化合物、是一种酮式类胡萝卜素，广泛存在于虾、蟹、藻类及真菌中，研究表明虾青素在抗氧化、提高免疫力、消除炎症、预防肿瘤、抑制自由基引发的脂质过氧化方面有显著效果，在食品添加剂、保健食品、医药、水产养殖和化妆品等方面有广泛的应用，建立快速、简便、精确的虾青素分析方法有其必要性。

虾青素(Astaxanthin)，化学名称为3,3’-二羟基-β,β’-胡萝卜素-4,4’-二酮[5]，分子式C₄₀H₅₂O₄，相对分子质量为596.86，熔点为216℃，不溶于水，易溶于丙酮、二氯甲烷、乙醚、正己烷等有机溶剂。

虾青素分子中有4个异戊二烯单位的共轭双键，是典型的类胡萝卜素碳链结构，虾青素分子中碳原子共轭双键链的两端有羟基和不饱和羰基构成α-羟基酮结构，这一结构具有非常活泼的电子效应，易于清除自由基等氧化成分，天然虾青素非常不稳定，易受到光热酸碱氧化剂的影响而被氧化成虾红素，从而被降解。

大量研究证实虾青素具有较强的抗氧化活性，在提高免疫力，预防肿瘤、心血管疾病、糖尿病等慢性疾病的发生发展，延缓衰老等方面具有积极的促进作用。有研究旨在探讨每日添加虾青素对身体物理性能的影响，研究结果表明，食用添加了虾青素的补充剂对于提高肌肉强度有一定效果，可以提高运动耐力。

现虾青素的检测多使用紫外分光光度法。紫外分光光度法是依据美国食品药品监督管理局(FDA)官方网站备案资料“Analysis of Total Astaxanthin in algae meal prepared from Haematococcus pluvialis”的方法制定。但分光光度法会受到样品本底的影响测定结果偏高。本发明所申请方法，具有较好的稳定性和精密度，较低的检出限和定量限，适合于产品中虾青素的检测。

由于虾青素具有上述优异的功效，目前已经广泛添加于各种产品中，做成运动营养补剂。为了更好的控制产品的质量，保证产品中虾青素的功效作用，必须对软胶囊中虾青素的含量进行准确检测。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种软胶囊中虾青素含量的检测方法，采用本发明提供的方法对软胶囊中虾青素的含量进行检测时的准确度高。

本发明提供了一种软胶囊中虾青素含量的检测方法，包括以下步骤：

a)、绘制标准曲线：准确称取全反式虾青素标准品用丙酮溶解并定容，然后稀释成不同浓度，用液相色谱分析仪测定得到虾青素标准曲线。

b)、提取：将待测样品，加入二氯甲烷-丙酮溶液，超声混合提取，得到提取液；

c)、皂化：向步骤2)得到的提取液中加入氢氧化钠-甲醇溶液，涡旋混匀，充氮密封反应，然后在反应液中加入磷酸-甲醇溶液中和剩余的碱，混匀，过滤膜，得滤液；

d)、采用色谱法检测所述滤液中的虾青素含量，得到滤液中虾青素的含量；

e)、根据所述滤液中虾青素的含量，得到待测样品中虾青素的含量。

优选的，步骤b)中，所述二氯甲烷-丙酮溶液的二氯甲烷和丙酮的体积比为100:1500至100:200，更优选为100:800至100:300，更优选为100:400至100:500。

优选的，步骤b)中，所述二氯甲烷-丙酮溶液中可以加入少量的，例如约0.5g的2,6-二叔丁基对甲酚混合后使用，所述2,6-二叔丁基对甲酚作为抗氧化剂有助于减缓虾青素被氧化。

优选的，所述待测样品为含有虾青素的片剂、注射剂、气雾剂、丸剂、胶囊剂、散剂或膏剂，优选为胶囊剂，更优选为软胶囊剂。

优选的，所述软胶囊待测样品中含有虾青素、葡萄籽油中的一种或多种。

优选的，步骤b)中所述待测样品与二氯甲烷-丙酮溶液的用量比为300ml二氯甲烷-丙酮溶液/每g待测样品至1000ml二氯甲烷-丙酮溶液/每g待测样品。

更优选地，步骤b)中所述待测样品与二氯甲烷-丙酮溶液的用量比为40ml二氯甲烷-丙酮溶液/每g待测样品至160ml二氯甲烷-丙酮溶液/每g待测样品；

进一步优选地，步骤b)中所述待测样品与二氯甲烷-丙酮溶液的用量比为60ml二氯甲烷-丙酮溶液/每g待测样品至160ml二氯甲烷-丙酮溶液/每g待测样品；

在本发明中，优选先将所述二氯甲烷和丙酮混合，得到二氯甲烷-丙酮溶液；再将所述软胶囊待测样品与二氯甲烷-丙酮溶液混合。