[发明专利]一种复合微生物菌剂的制备方法和用途

说明书

本发明公开了一种含有枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、胶冻样类芽孢杆菌的复合微生物菌剂，按照各自发酵液合理配比，达到各种功能菌共生共存，其到复合作用的目的，应用于作物增加产量，该产品可广泛应用于农业种植上，具有优良的综合效益。

技术领域

本发明涉及到微生物发酵工程领域，具体涉及到由枯草芽孢杆菌、地衣芽胞杆菌、胶冻样类芽孢杆菌合理配比制备农用微生物菌剂，属于农业投入品，微生物肥料。

背景技术

微生物菌剂是以微生物的生命活动提供作物所需特定肥料效应的一种制品，属于生物肥料的一种，微生物菌剂作为活体肥料，主要依靠它含有特定的功能微生物来完成的，这些微生物在进行旺盛的繁殖和新陈代谢时，把自然界无法利用的物质转化成可被植物利用的物质，并且不断积累有益代谢的产物，促进作物的良性生长。

随着土壤污染、土壤酸化越来越严重，土壤修复势在必行，微生物菌剂则是土壤修复 剂中的利刃。然而不同的微生物具有不同的功能性，单独使用只能实现单一功效，不同种类 混合使用，由于微生物生长过程中存在抗性，会导致个别功能性菌竞争丧失，无法生长，便 达不到预期的效果，如何让几种常见的功能微生物，合理的混合，使其在使用中互不干扰、 和平共处、是复合微生物紧急发展的重中之重。

发明内容

本发明的目的是提供一种具有较好肥效的微生物菌剂，为达到上述目的，本发明所述的各种微生物菌剂合理配比成一种农用复合微生物菌剂。

本发明是由枯草芽孢杆菌、地衣芽胞杆菌和胶冻样类芽孢杆菌，按照发酵液中有效活菌数按照重量进行配比，得到复合微生物菌剂的有效活菌，不低于1.0×109CFU/ml。

本发明的农用复合微生物菌剂的制备方法，其中所述的3种菌种复壮后接种到种子培养基中，生长至对数生长期后，分别接种到发酵培养基中，得到芽孢转化率达到90%以上，按需有效活菌数的比例，进行复配。

本发明的农用复合微生物菌剂，由3种功能性微生物复合而成，具有明显的解磷、解钾，固氮的功能，同时可分泌多种作物刺激素和杀菌物质，通过田间肥效实验表明，对多种作物均有较明显的增产提质的作用。

本发明通过3种微生物独立进行发酵，将各自的发酵液按照3：3：4的配比，添加适量保护剂制得复合微生物的菌剂。

具体实施方式：

下面结合实施例，对本发明的具体实施方式进一步详细描述，以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

实施例一，本发明的枯草芽孢杆菌、地衣芽胞杆菌、胶冻样类芽孢杆菌的发酵工艺条件的研究。

1.枯草芽孢杆菌、（CGMCC NO、9269）发酵液的制备：在无菌室中，用接种针从菌种保存管中蘸出少许菌种，涂布在预先制备好的平板上，在34℃恒温培养箱中培养2-3天，菌落成乳白色，附着在培养基表面，挑取单菌落，制备茄子瓶斜面，得斜面菌苔成熟后，用生理盐水洗下，进行摇瓶菌种的活化，将活化好的种子转接到一级发酵瓶中，培养10h，达到对数生长期后，转入发酵罐中，接种量为10%，通气搅拌培养24h左右，待镜检芽孢转化率大于90%后，停止发酵。

发酵及种子的培养基配方为：鱼粉5g、淀粉10g、葡萄糖1g 、KH2PO4 0.4g、MgSO40.75g、 CaCO3 5g、花生饼粉20g、泡敌0.01g 蒸馏水1000mL ，按照比例配置液体培养基。

2.地衣芽胞杆菌（CGMCC NO 1.0265）在无菌室中，用接种针从菌种保存管中蘸出少许菌种，涂布在预先制备好的平板上，在34℃恒温培养箱中培养2-3天，菌落成灰白色，菌体可生长到培养基内部，挑取单菌落，制备茄子瓶斜面，得斜面菌苔成熟后，将培养基挖下，放入灭菌好的摇瓶中，进行摇瓶菌种的活化，将活化好的种子转接到一级发酵瓶中，培养15h，达到对数期后，转入发酵罐中，接种量为10%,通气搅拌培养24h左右，待镜检芽孢转化率大于90%后，停止发酵。