[发明专利]一种检测牛奶中抗生素含量的方法

权利要求书

1.一种检测牛奶中抗生素含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）称取3±0.02mL待测牛奶于50mL离心管中，用1％磷酸盐缓冲液20mL稀释，漩涡混匀，于75-85℃水浴加热3-8min，冷却后离心10-20min，移取上清液于10mL离心管中；残渣用4mL1％磷酸盐缓冲液重复提取，离心后合并上清液，作为备用液；

2）氨基固相萃取柱，用6mL乙腈活化，移取备用液过柱，收集流出液，用乙腈溶液定容至5mL，混匀，过滤，制得待测样品；

3）液相色谱-串联质谱检测

色谱条件：高效液相色谱柱：Hypersil Golden C18色谱柱，150mm×2.1mm，5μm；流速：0.2mL/min；

质谱条件：采用电喷雾离子源测定，在多反应监测模式下，用正、负离子模式同时进行扫描，喷雾电压为4000-6000V；鞘气压力30-40arb；A辅助气压力3-6arb；毛细管温度340-360℃；

建立空白牛奶标准谱图库与含有抗生素的牛奶标准谱图库；将待测样品通过检测后与空白牛奶标准谱图库与含有抗生素的牛奶标准谱图库进行比对，得到待测牛奶中抗生素含量。

2.根据权利要求1所述的检测牛奶中抗生素含量的方法，其特征在于，步骤1）中，离心转速为5000r/min。

3.根据权利要求1所述的检测牛奶中抗生素含量的方法，其特征在于，步骤2）中，50％乙腈溶液为乙腈和水的混合溶液，乙腈和水的体积比为1:1。

4.根据权利要求1所述的检测牛奶中抗生素含量的方法，其特征在于，步骤2）中，过滤采用0.22μm微孔尼龙滤膜。

5.根据权利要求1所述的检测牛奶中抗生素含量的方法，其特征在于，步骤3）中，采用的流动相为：A：乙腈，B：0.1％浓度的甲酸水-5mmol/L的甲酸胺溶液，采用梯度洗脱。

6.根据权利要求1所述的检测牛奶中抗生素含量的方法，其特征在于，步骤3）中，喷雾电压为5000V；鞘气压力35arb；A辅助气压力5arb；毛细管温度350℃。