[发明专利]干热灭菌内毒素指示剂试剂盒

说明书

技术领域

本发明公开一种内毒素指示剂试剂盒，按国际专利分类表(IPC)划分属于检测试剂盒制造技术领域，尤其是涉及一种用于验证干热灭菌设备除内毒素（热原）效果的试剂盒。

背景技术

除去细菌内毒素是制药与生物制品工业的一个重要问题。 干热法除去热原是常用的手段。 干热灭菌设备作为注射药品生产中的重要设备，根据药品生产规范的要求必须作设备验证。中国药典2010附录ⅩⅥ灭菌法项目规定：细菌内毒素灭活验证试验是证明干热灭菌除热原过程有效性的试验。一般将不小于1000单位的细菌内毒素指示剂加入待去热原的物品中，证明该去热原工艺能使内毒素效价下降1000倍以上，内毒素指示剂在干热灭菌过程前后效价的变化是通过鲎试剂来判断的，但目前还没有专门用于干热灭菌内毒素指示剂的试剂盒，并且采购的实验所用的细菌内毒素指示剂纯度不够，高温加热时炭化，从而影响到实验结果。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供了一种使用方便的干热灭菌内毒素指示剂试剂盒，符合中国药典2010附录ⅩⅥ灭菌法项目规定，使用时，将内毒素指示剂置于待验证的干热灭菌设备或加入到待除热原的物品中，干热灭菌前后用鲎试剂检测内毒素水平，证明该去热原设备或工艺能使内毒素水平至少下降3 个对数单位。

为达到上述目的，本发明是通过以下技术方案实现的：

一种干热灭菌内毒素指示剂试剂盒，包括盒体及其内的若干细菌内毒素指示剂瓶及鲎试剂瓶，其中：

细菌内毒素指示剂瓶，其内灌装高纯度内毒素，且内毒素的效价为1000~10000EU/瓶；

鲎试剂瓶，其内灌装凝胶法鲎试剂或定量法鲎试剂。

进一步，所述细菌内毒素指示剂瓶内的高纯度内毒素是从大肠杆菌O111：B4或O55：B5菌株提取的精致内毒素。

进一步，所述的鲎试剂瓶为安瓿瓶，其内鲎试剂的装量为0.1ml。

进一步，所述的细菌内毒素指示剂瓶与鲎试剂瓶的数量分别为二十支安瓿瓶和十支安瓿瓶。

本发明中内毒素指示剂是从大肠杆菌O111：B4或O55：B5等菌株提取的精致内毒素，经过特殊工艺干燥在玻璃安瓿中。 内毒素指示剂的效价为每瓶1000~10000EU。 内毒素指示剂不含任何稳定剂、赋形剂和分散剂， 防止在高温加热时炭化，影响实验结果。由于玻璃容器内的固体内容物很少，所以看上去像一支空瓶。

本发明使用时，将内毒素指示剂在最大负载状态下放置于干热灭菌设备的冷点区域，进行内毒素挑战实验。用试剂盒配套的鲎试剂采用凝胶法或定量法检测内毒素指示剂在干热灭菌程序开始前和干热灭菌程序结束后效价的变化情况，如果内毒素指示剂的效价下降至少1000倍，则该次干热灭菌达到药典规定的灭菌要求。

本发明的优点是内毒素指示剂纯度高，效价稳定，不含稳定剂、赋形剂和分散剂，在高温灭菌时不炭化，不影响灭菌后的内毒素效价检测；另外由于本发明符合中国药典2010附录ⅩⅥ灭菌法项目规定，使用简单方便。

附图说明

图1是本发明结构示意图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明作进一步说明：

实施例：请参阅图1，一种干热灭菌内毒素指示剂试剂盒，包括盒体1及其内的二十支细菌内毒素指示剂瓶11及十支鲎试剂瓶12，大肠杆菌O111：B4提取的精致内毒素，经过特殊工艺干燥在玻璃安瓿中制作细菌内毒素指示剂瓶，且内毒素指示剂的效价为每瓶1000-10000EU，内毒素指示剂不含任何稳定剂、赋形剂和分散剂；凝胶法或定量法鲎试剂，装量为0.1ml/支，灌装于无热原安瓿中，冷冻干燥封口。

本发明的使用方法：

1. 内毒素指示剂的挑战实验

试验在干热灭菌设备最大装载条件下进行，在干热灭菌设备的各冷点位置分别放置1-2支未开启的内毒素指示剂。运行实际的干热除热原程序。干热灭菌过程结束后，取出各支内毒素指示剂；

2. 确定未经干热灭菌处理过的内毒素指示剂效价

2.1任取1-2支未经干热灭菌处理过的内毒素指示剂, 用1.0 ml细菌内毒素检查用水溶解，在旋涡混合器上剧烈振摇15分钟；