[发明专利]一种改性修饰多壁碳纳米管分散固相萃取/UPLC-MS测定EGCG棕榈酸酯的方法

说明书

本发明涉及一种改性修饰多壁碳纳米管分散固相萃取/UPLC‑MS测定EGCG棕榈酸酯的方法，属于茶多酚的EGCG分析技术领域。本发明将Fe₃O₄纳米粒子键合SiO₂并进行苯乙基‑C₈修饰多壁碳纳米管，修饰后的多壁碳纳米管对疏水性能不同的化合物具有高度的选择性。联合UPLC‑MS同时检测了茶叶中EGCG棕榈酸酯palmitate及多种EGCG活性成分，方法操作简单、快速、准确、成本低。

技术领域

本发明涉及一种改性修饰多壁碳纳米管分散固相萃取/UPLC-MS测定EGCG棕榈酸酯的方法，属于茶多酚的EGCG分析技术领域。

背景技术

茶多酚(tea polyphenols，TP )由多种酚类物质组成，具有丰富的酚羟基，因其结构的特殊性而具有多种生物活性。茶多酚除了抗氧化作用外，在抗衰老、抗炎症、抗病毒、预防心血管疾病等方面具有多种保健功能，因而在医疗、食品、保健等方面具有广泛的应用前景。

茶多酚组成极为复杂，因分子量及其结构差异而具有不同的生物活性。其中最为核心的成分是儿茶素 (黄烷醇类物质)，主要包括8种儿茶素类活性成分：儿茶素(catechin，C)、表儿茶素(epicatechin，EC) 、没食子儿茶素(gallocatechin，GC)、表没食子儿茶素 (epigallocatechin，EGC)、儿茶素没食子酸酯(catechin gallate，CG )、表儿茶素没食子酸酯(epicatechin gallate，ECG)、没食子儿茶素没食子酸酯(gallocatechingallate，GCG)及表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate，EGCG)。其中EGCG 含量最高，占儿茶素总量的50％～80％。8种儿茶素类活性成分的分子结构式及EGCG-p如图1所示。

由于茶多酚的高水溶性，影响了其在生物体内的利用率。有研究显示取代后的EGCG棕榈酸酯(EGCG-p)具有更强的抗氧化性。研究人员将茶多酚中的主要成分EGCG通过与棕榈酸氯酯化反应制备成脂溶性的EGCG-p。

茶多酚含量的检测基本上采用理化分析法、光谱分析法、电化学方法、流动注射化学发光法等，测定的是总酚的含量。对于开发药用级和保健功能的茶多酚，活性成分及异构体的分离检测对茶多酚的功能和应用极为重要。有用HPLC分析几种多酚的报道，最近有文献报道了C18核壳粒子填充毛细管柱采用纳米液相色谱法，同时分离分析了几种多酚和甲基黄嘌呤。人们关注的重点是儿茶素类多酚物质的分析分离，而对于茶多酚里是否含有高活性的EGCG-p以及EGCG-p的提取分析还未有报道。

碳纳米管(CNTs)是由碳六元环构成的类石墨平面卷曲而成的纳米级中空管，具有比表面积大、耐酸碱耐热性好等独特的物理化学性质，比C18具有更大的比表面积和更强的吸附能力。然而，CNTs 表面含有丰富的π电子，存在疏水性较强，易团聚的缺陷。

发明内容

本发明的目的是提供一种改性修饰多壁碳纳米管分散固相萃取/UPLC-MS测定EGCG棕榈酸酯的方法，用于茶多酚里是否含有高活性的EGCG-p以及EGCG-p的提取分析。

本发明的技术方案：一种改性修饰多壁碳纳米管分散固相萃取/UPLC-MS测定EGCG棕榈酸酯的方法，步骤为：

一、磁性碳纳米管制备

（1.1）多壁碳纳米管酸化

取1g外径为10～20nm，纯度97％的多壁碳纳米管MWNTs，放入80mL浓硝酸中，60℃回流3.5h；冷却至室温，过滤，用去离子水洗涤至滤液呈中性，于60℃烘干过夜，得到酸化多壁碳纳米管AMWNTs，干燥器中保存；

（1.2）改性磁性纳米粒子的制备