[发明专利]一种基于表面增强拉曼光谱的乙酰胆碱检测方法

权利要求书

1.一种基于表面增强拉曼光谱的乙酰胆碱检测方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：

1)利用金属纳米材料制备表面增强拉曼散射衬底：利用聚合物分子对玻璃基底或硅基底表面进行改性，使玻璃基底或硅基底表面电性与金属纳米材料所带电荷电性相反，从而利用静电作用将金属纳米材料吸附在玻璃基底或硅基底表面，形成表面增强拉曼散射衬底；

2)将乙酰胆碱和有机分子溶液加至表面增强拉曼散射衬底表面进行反应，且乙酰胆碱与所述有机分子竞争性吸附于表面增强拉曼散射衬底表面；

3)检测表面增强拉曼散射衬底表面上有机分子的拉曼光谱，根据乙酰胆碱浓度和有机分子表面增强拉曼光谱之间的校准曲线，实现对乙酰胆碱的定量检测；

其中：步骤1)所述的利用金属纳米材料制备表面增强拉曼散射衬底的具体步骤如下：

①当金属纳米材料表面带负电荷时，将清洗吹干的玻璃基底或硅基底与0.02wt％以上的聚二烯丙基二甲基氯化铵、3-氨丙基三乙氧基硅烷或3-氨丙基三甲氧基硅烷水溶液反应30min以上，清洗残余的反应溶液后将该玻璃基底或硅基底与金属纳米溶液反应30分钟以上，去除残余金属纳米溶液得到表面增强拉曼散射衬底；

②当金属纳米材料表面带正电荷时，将清洗吹干的玻璃基底或硅基底先与0.02wt％以上的聚二烯丙基二甲基氯化铵、3-氨丙基三乙氧基硅烷或3-氨丙基三甲氧基硅烷水溶液反应30min以上，之后再与0.02wt％以上的聚丙烯酸钠或聚苯乙烯磺酸钠水溶液反应30min以上，清洗残余的反应溶液后将该玻璃基底或硅基底与金属纳米溶液反应30min以上，去除残余金属纳米溶液得到表面增强拉曼散射衬底。

2.如权利要求1所述的一种基于表面增强拉曼光谱的乙酰胆碱检测方法，其特征在于：所述的清洗吹干的玻璃基底或硅基底是指经过食人鱼溶液清洗1h以上并经氮气吹干的玻璃基底或硅基底。

3.如权利要求1所述的一种基于表面增强拉曼光谱的乙酰胆碱检测方法，其特征在于：步骤3)所述的乙酰胆碱浓度和有机分子表面增强拉曼光谱之间的校准曲线绘制过程如下：保持有机分子浓度不变，改变乙酰胆碱浓度，检测有机分子的表面增强拉曼光谱强度，根据检测到的有机分子的表面增强拉曼光谱强度和所用的乙酰胆碱浓度之间的对应关系，建立乙酰胆碱浓度和有机分子表面增强拉曼光谱之间的校准曲线。

4.如权利要求1所述的一种基于表面增强拉曼光谱的乙酰胆碱检测方法，其特征在于：所述的金属纳米材料为金纳米材料、银纳米材料。

5.如权利要求1所述的一种基于表面增强拉曼光谱的乙酰胆碱检测方法，其特征在于：所述的表面增强拉曼散射衬底具有粗糙金属表面，能够吸附乙酰胆碱和与乙酰胆碱具有竞争性吸附作用的有机分子，并产生表面增强拉曼散射效应。

6.如权利要求1所述的一种基于表面增强拉曼光谱的乙酰胆碱检测方法，其特征在于：所述的有机分子为括罗丹明6G、罗丹明B、结晶紫、尼罗蓝、亚甲基蓝或中性红中的一种。

7.如权利要求1所述的一种基于表面增强拉曼光谱的乙酰胆碱检测方法，其特征在于：所述的有机分子的浓度为10nM以上。

8.如权利要求1所述的一种基于表面增强拉曼光谱的乙酰胆碱检测方法，其特征在于：所述的将乙酰胆碱和有机分子溶液加至表面增强拉曼散射衬底表面进行反应，反应时长为10min～120min。

9.如权利要求1所述的一种基于表面增强拉曼光谱的乙酰胆碱检测方法，其特征在于：步骤3)所述的检测表面增强拉曼散射衬底表面上有机分子的拉曼光谱，所用仪器为拉曼光谱仪。