[发明专利]拟南芥U1A基因在提高植物耐盐性中的应用

说明书

本发明提供了拟南芥U1A基因在提高植物耐盐性中的应用。所述拟南芥耐盐基因U1A的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明首次证明拟南芥U1A基因参与了植物抵抗盐胁迫的生物学过程，将拟南芥U1A基因应用于培育耐盐植物，以及作为耐盐育种技术领域具有良好的应用前景。

技术领域

本发明属于基因工程领域，特别涉及一种拟南芥U1A基因在提高植物耐盐性中的应用。

背景技术

土壤盐渍化是全球化问题，大量的土地已经发生了盐渍化，目前还有更多的土地在盐渍化的进程中，盐胁迫己经成为全世界范围内影响农业生产的最重要的环境胁迫因子。因此，如何提高植物的耐盐性成为科研工作者的重要研究方向，因此克隆植物耐盐基因、利用这些基因培育新的耐盐作物品种是目前科学研究的重要议题。

科学家们利用基因工程技术开展植物耐盐方面研宄已取得了较大的进展，已经克隆了大量耐盐相关基因，并将这些基因转入植物中，用于耐盐机制研究。实验表明植物本身或其它生物中与耐盐相关的基因转入作物中，仍可使抗盐能力得到提高。因此利用模式植物拟南芥鉴定耐盐相关基因具有极其重要的意义。目前，己发现了一些能显著提高植物耐盐能力的基因，但有关U1A基因在植物耐盐过程中的作用尚未见报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种拟南芥U1A基因及其在提高植物耐盐性中的应用。

本发明通过合成拟南芥cDNA，提取拟南芥叶片总RNA，反转录得到第一链cDNA，以拟南芥叶片cDNA为模板，根据U1A基因序列设计引物(SEQ ID NO.3-4所示)，进行PCR扩增，回收和纯化PCR扩增产物，并测序。得到拟南芥U1A基因。

本发明提供的拟南芥U1A基因具有(1)或(2)所示的核苷酸序列：

(1)SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；

(2)SEQ ID No.1所示的核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或几个核苷酸而形成的具有同等功能的核苷酸序列。

该基因编码蛋白的氨基酸序列为：

(1)SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列；

(2)SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或几个氨基酸而形成的具有同等功能的由(1)衍生的氨基酸序列。

含有上述拟南芥U1A基因的表达载体、细胞系、宿主菌均属于本发明的保护范围。

本发明提供了上述拟南芥U1A基因在提高植物耐盐性中的应用。

本发明提供了上述拟南芥U1A基因在制备转基因植物中的应用。

本发明提供了上述拟南芥U1A基因在植物种质资源改良中的应用。

本发明提供了用于PCR扩增上述拟南芥U1A基因的引物，其核苷酸序列如SEQ IDNO.3-4所示。

进一步，本发明提供了一种用于克隆上述拟南芥U1A基因的方法，该方法所用的引物序列如SEQ ID NO.3-4所示。

PCR反应体系和扩增条件见表1。回收和纯化PCR扩增产物的具体操作如下：凝胶电泳后，用干净的刀片将带有目的片段的胶切割下来，放入到离心管中，胶不要切得过大，以避免回收时DNA片段溶液含有大量的杂质；向离心管中加入3倍体积的QG溶液(体积/胶质量)后，在50℃条件下温浴10min，直到胶完全融化；将离心管中的溶液移到2ml的吸附柱中，离心1min，弃去液相；再次向吸附柱中加入0.5ml的QG溶液，离心1min，弃去液相；向吸附柱加入0.75ml的PE溶液，离心1min，弃去液相；再次离心1min后，将吸附柱放置在一个新的离心管上，加入50μl的溶解液，静置1min，最后离心1min，得到的液相即为回收的DNA溶液。