[发明专利]测定玄参提取物指纹图谱的方法

说明书

一种测定玄参提取物指纹图谱的方法。该方法以水作为提取溶剂制备玄参提取物，以玄参提取物为检测对象，建立了针对玄参药材、饮片、提取物和制剂的指纹图谱方法，获得了较为全面的图谱信息，确认了玄参提取物的共有峰10个，其中6个峰得到指认。结合该指纹图谱中多个色谱峰的信息，能够全面地、快速地检测其质量，有利于其全面质量检测和质量控制。本发明提供的方法对于指导在临床用药及生产过程中对于原料药有效的投料指导、确保质量的可靠具有积极作用；操作简便、快捷，对中药玄参提取物质量进行评价，结论较为客观、准确。

技术领域

本发明涉及一种识别化合物方法，尤其涉及一种获得提取自玄参提取物指纹图谱的方法，以实现对利用玄参开发药物的质量监测，使得检测过程更稳定。

背景技术

玄参为玄参科植物玄参(Scrophularia ningpoensis Hemsl.)的干燥根。性甘、苦、咸，微寒。归肺、胃、肾经。功能清热凉血，滋阴降火，解毒散结。用于热入营血，温毒发斑，热病伤阴，舌绛烦渴，津伤便秘，骨蒸劳嗽，目赤，咽痛，白喉，瘰疬，痈肿疮毒。始载于《神农本草经》，被列为中品。玄参在传统方剂中有大量应用，如养阴清肺汤、清营汤、百合固金汤等。同时玄参在《中华人民共和国药典》收录的现代中成药中也有广泛使用，如养阴清肺膏、清热解毒口服液、清瘟解毒丸等。

玄参中主要含环烯醚萜类、苯丙素苷类和芳香糖苷类等成分。其中，环烯醚萜苷类化合物哈巴苷(C₁₅H₂₄O₁₀)和哈巴俄苷(C₂₄H₃₀O₁₁)为《中国药典》规定的含测指标成分。然而仅测定某类成分的含量，难以客观、有效地评价或控制玄参药材的质量。中国发明专利ZL200810184570.5公开了一种玄参配方颗粒及其制备方法和质量控制方法，将红外光谱技术应用于中药的质量控制，快速地解决了中药宏观质量控制中的一个首要问题——中药真伪的鉴定，但是该方法所采用的红外指纹图谱进行质量鉴别，其专属性不强。中国发明专利申请201610423663.3公开了一种建立玄参的药物制剂的指纹图谱的方法，采用高效液相法建立指纹图谱，获得了哈巴苷、哈巴俄苷和肉桂酸等化合物的3个色谱峰，但特征峰较少。此外，采用通用的反相C-18柱，使得分析所用的时间偏长。因此，建立一种能够快速全面地、快速地检测玄参提取物的方法，对于其全面质量检测和整体质量控制具有重要意义。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种测定玄参提取物指纹图谱的方法，该方法可有效地监控玄参药材、饮片、中间品和制剂的质量，保证其在临床或生产应用时的有效、安全和稳定。

本发明提供的一种测定玄参提取物指纹图谱的方法，包括：

取玄参提取物，加水，35KHz～60KHz超声提取2分钟～10分钟，过滤(如：采用孔径为0.22μm滤膜过滤)，取续滤液，即得供试品溶液；

取哈巴苷对照品、哈巴俄苷对照品、毛蕊花糖苷对照品、桃叶珊瑚苷对照品、安格洛苷C对照品和肉桂酸对照品，制成对照品溶液；

将供试品溶液和对照品溶液分别吸取2μl，分别于高效液相色谱仪上样，流速为0.7ml·min^-1，检测波长205nm～215nm，流动相A为0.03v/v％磷酸水溶液，流动相B为乙腈，采用流动相A和流动相B相混合的洗脱方式洗脱，流动相B在各个洗脱时间的用量变化如下：

0min～5min：流动相B为2v/v％，

5min～12min：流动相B由2v/v％提高至10v/v％，

12min～25min：流动相B由10v/v％提高至33v/v％，

25min～30min：流动相B由33v/v％提高至35v/v％，

30min～32min：流动相B为35v/v％。