[发明专利]一种一步检出唾液中毒品四项的方法

权利要求书

1.一种一步检测唾液中毒品四项的方法，其特征在于，采用苯胺还原法制备胶体金颗粒，标记冰毒抗体、可卡因抗体、吗啡抗体、K粉抗体并均匀涂布于胶体金垫上，作为示踪标记物；在硝酸纤维素膜上，分别将特定浓度的MET-BSA、COC-BSA、MOP-BSA、KET-BSA偶联物固定于四个检测线，即T1、T2、T3、T4线，羊抗鼠二抗固定于质控线，即C线；依次将样本垫、胶金垫、硝酸纤维素膜和吸水滤纸组装，剪成胶体金试纸并装入检测卡中；金标抗体与相应的抗原、抗体发生特异性结合被截留而显色，根据T线、C线显色与否来判断检测结果。

2.根据权利要求1中的方法，其特征在于胶体金标记物通过以下步骤进行制备：先配制胶体金溶液，再制备胶体金标记物。

3.根据权利要求2中的方法，其特征在于胶体金溶液的配置通过以下步骤进行：

（1）配制0.25%氯金酸溶液；

（2）配制1%-2%苯胺溶液；

（3）配制3%-5%十二烷基硫酸钠；

（4）将100ml0.25%的氯金酸溶液加热至沸腾，迅速加入1%-2%的苯胺溶液1ml以及20μL3%-5%的十二烷基硫酸钠；

（5）溶液由浅蓝色，深蓝，再加热出现酒红色，继续煮沸20min；停止加热，继续搅拌至室温。

4.根据权利要求3中的方法，其特征在于配制的氯金酸溶液浓度为0.25%。

5.根据权利要求3中的方法，其特征在于配制的苯胺溶液浓度为1%-2%。

6.根据权利要求3中的方法，其特征在于配制的十二烷基硫酸钠溶液浓度为3%-5%。

7.根据权利要求3中的方法，其特征在于胶体金标记物的制备通过以下步骤进行：

（1）取八个1.5 mL试管，分别加入1 mL胶体金溶液；

（2）加入适量K₂CO₃把pH调整为8.0；

（3）其中两个管各加入5μg/mL MOP抗体、两个管各加入12μg/mLMET抗体、两个管各加入8μg/mLKET抗体、两个管各加入9μg/mLCOC抗体，抗体混匀，振荡30min；

（4）加入一定量甘油，混匀，振荡30min；

（5）8000rpm离心5min，轻轻吸除上清；

（6）用100mL胶体金复溶液重悬浮胶体金沉淀制成浓缩液

（7）用复溶液将上述浓缩液稀释到适当的比例；

（8）玻璃纤维素膜点样，形成胶金垫，真空冻干3小时。

8.根据权利要求7中的方法，其特征在于步骤（4）中加入10-15μL1%的甘油。