[发明专利]一种从臭丹灵草中提取洋艾素的方法

说明书

所属技术领域

本发明涉及一种从臭丹灵草中提取高纯度洋艾素的方法，属于天然产物化学的技术领域。

背景技术

臭丹灵草为菊科植物翼齿六棱菊Laggera pterodonta(DC.)Benth.的干燥地上部分。别名狮子草、臭叶子、六棱菊等，主要分布于我国长江流域以南及西南部。具有清热解毒、消肿排脓、通气止痛的功效，《滇南本草》记载其有“治风热积毒、痈疽、疮疖、疥癣、白风癣疮”等功效。在民间应用广泛，主要用于治疗上呼吸道感染、扁桃体炎、咽喉炎、口腔炎、支气管炎、感冒、疟疾、痈肿疥疮等。臭灵丹含有挥发油、黄酮类、倍半萜、二萜类等成分，其中主要活性成分为黄酮类化合物，如洋艾素、金腰乙素、橙皮苷、槲皮素等。

洋艾素又称艾苦素，橙色针状结晶，味很苦，微溶于水、石油醚，可溶于乙醇、乙醚、苯、氯仿、氧氧化钠溶液。洋艾素主要存在于菊科植物洋艾(苦艾)的叶和花稍、大籽篙中。

公开号为CN102336731A的中国专利介绍了一种制备洋艾素的方法。方法如下：取臭灵丹草粉碎，加入5-15倍量40-90％甲醇溶液超声提取2-3次，提取液减压浓缩至无醇放置沉淀，沉淀物滤出用饱和石灰石水溶解，除去不溶物，再调节中性，过滤，滤出物采用高速逆流色谱分离，紫外检测器检测，收集目标成分，浓缩结晶，干燥得洋艾素。本发明的方法步骤操作简单，可连续化生产，生产周期短、效率高，适合高纯度洋艾素的生产。

公开号为CN102285952A的中国专利介绍了一种从臭灵丹草中提取洋艾素的方法。方法步骤如下：a取臭灵丹草粉碎40-80目，加入超临界萃取釜中，在萃取压力15-30MPa、温度40-50℃的条件下，超临界CO₂梯度萃取，解析，得粗提物；b上述粗提物加入聚酰胺树脂干燥，装柱，乙醇溶液梯度洗脱，薄层检测，收集高浓度流分，浓缩结晶，再采用乙醇溶液溶解重结晶，干燥即得洋艾素。本发明的方法具有能耗低，污染小，效率高等特点，适合工业化生产。

公开号为CN1733040的中国专利介绍了一种灵丹草含片及其制备方法和灵丹草制剂的洋艾素含量测定方法，灵丹草含片是以中药灵丹草及适量辅料制成的含片。该含片经口腔黏膜吸收，用于治疗咽炎、扁桃体炎等上呼吸道炎症见效快，疗效好，生物利用度高。此外，本发明还公开了一种灵丹草含片制剂的洋艾素含量测定方法，方法如下：从灵丹草中经反复提取分离得到黄酮类化合物洋艾素，并以其为对照品，采用高效液相色谱法测定灵丹草制剂中洋艾素的含量。该方法简单，快速，准确度高，重现性好，在灵丹草制剂的生产和质量控制中有较强的实用性。

综上所述，从臭丹灵草中提取纯化活性成分的研究较少，目前，洋艾素提纯工艺是采用醇提后高速逆流色谱分离、超临界CO₂梯度萃取等方法，均需要特殊的仪器设备，不便宜大规模生产，同时增加了洋艾素的生产成本。所以，探索采用常见设备和方法提取洋艾素意义非凡。

发明内容

目前公开的文献资料提取纯化洋艾素均需要昂贵的仪器设备和特殊的方法，本发明提供一种操作简单、工艺合理、快速提取洋艾素的生产工艺。

本发明采用的技术方案包括：对臭丹灵草采用醇回流提取，过滤，滤液浓缩，得浸膏；浸膏加碱溶解，过滤，滤液加酸调pH，乙酸乙酯萃取，萃取液浓缩上硅胶柱纯化，结晶，重结晶得洋艾素纯品。

因此，本发明提供一种从臭丹灵草中提取高纯度洋艾素的方法，具体步骤如下：

(1)将臭丹灵草粉碎至80目～120目，加70～90％乙醇溶液回流提取2次，每次2小时，过滤，合并滤液，滤液在55℃～65℃减压浓缩至干，得浸膏Ⅰ；

(2)将浸膏Ⅰ加1-5％NaOH溶液溶解，过滤，滤液滴加浓盐酸调pH值至2-4，加两倍体积的乙酸乙酯萃取2次，每次1小时，合并乙酸乙酯萃取液，浓缩至干，得浸膏Ⅱ；

(3)将浸膏Ⅱ加70～80％乙醇溶解，上硅胶层析柱(200～300目)，吸附30min后，先用1-3BV上柱液的水洗脱，弃去水洗脱液，再用5-8BV上柱液的80-95％乙醇洗脱，收集醇洗脱液；

(4)将步骤(3)中的醇洗脱液浓缩至结晶析出，放置30min，再重结晶2次，得洋艾素纯品。

所述步骤(1)中所述加入70-90％乙醇溶液，按体积(L)/臭丹灵草重量(kg)比为8-10:1。

所述步骤(2)中所述加入1-5％NaOH溶液的量，按体积(L)/浸膏Ⅰ重量(kg)比为3-5:1。