[发明专利]一种电针法治疗血管性痴呆大鼠学习记忆能力的方法

说明书

一种电针法治疗血管性痴呆大鼠学习记忆能力的方法，采用28号25mm毫针，于模型大鼠头部百会穴（顶骨正中）斜刺10mm，大椎穴（第７颈椎下）、脾俞穴（第12胸椎下两旁肋间）和肾俞穴（第２腰椎下两旁）各直刺５mm，连接电针仪，施以连续波，频率150Hz，强度以大鼠安静耐受为度（约１mA），每天电针１次，留针20min；连续治疗15d。

技术领域

本发明涉及一种电针法治疗血管性痴呆大鼠学习记忆能力的方法，具体地说是以一种电针法治疗血管性痴呆大鼠学习记忆能力的方法。

背景技术

目前公知的针灸治疗血管性痴呆（vascular dementia,VD）具有多系统、多水平、多层次、多靶点的特点。在长期的临床和科研实践中，总结出“通督调神固本”之法，选取精而少的穴位（百会、大椎、脾俞、肾俞）治疗ＶＤ，取得了肯定的临床疗效，并通过对氧自由基、脑神经递质及脑细胞超微结构等的观察加以证实。

发明内容

材料与方法

1 动物、分组与造模；成年雄性健康ＳＤ大鼠（ＳＰＦ级）48只，体质量180~220g，由广州中医药大学实验动物中心提供〔实验动物许可证号：ＳＣＸＫ（粤）2003-000１；使用实验动物质量合格证编号：0010036〕。随机抽取８只大鼠作假手术对照组，其他40只均采用改良的四血管阻断法复制ＶＤ模型。术后7d存活并无肢体残疾的大鼠25只，将其随机分为电针组９只、西药组８只和模型组８只。假手术组８只全部存活。实验动物均按常规饲养。

2 主要仪器；ＳＤＱ-30双极射频电凝器（上海手术器械厂）；Morris水迷宫（广州中医药大学实验动物中心提供）；Ｇ6805-１型治疗仪（中国青岛华声仪器厂）；１次性无菌针灸针（苏州天一针灸器械有限公司）；ＳＮ-695Ｂ型放免γ测量仪（上海核仪器一厂）。

3 治疗方法；电针组采用28号25mm毫针，参考《实验针灸学》取穴，于模型大鼠头部百会穴（顶骨正中）斜刺10mm，大椎穴（第７颈椎下）、脾俞穴（第12胸椎下两旁肋间）和肾俞穴（第２腰椎下两旁）各直刺５mm，连接电针仪，施以连续波，频率150Hz，强度以大鼠安静耐受为度（约１mA），每天电针１次，留针２０min；西药组给予尼莫通（拜耳医药保健有限公司生产，批号：110156），按12mg／kg灌胃，每日１次；模型组给予生理盐水，按20mL/kg灌胃，每日１次。各组均连续治疗15d。假手术组在同等条件下饲养，未予任何治疗。

4 检测方法；为学观测治疗结束后开始水迷宫检测。水迷宫内水深41cm，水温22℃~26℃。在水池壁标明４个入水点，由此将水池等分为４个象限（Ｅ，Ｓ，Ｗ，Ｎ），任选一象限正中放置平台，没于水下１cm，水面覆盖塑料泡沫。①定位航行试验：将受试大鼠按顺时针方向依次由Ｅ，Ｓ，Ｗ，Ｎ４个入水点面向池壁放入水中。记录２min内寻找平台的时间（逃避潜伏期，escape latency）。如果大鼠在２min内找到平台，记录其实际逃避潜伏期；如果在２min内未找到平台，由试验者将其引上平台并停留10s，逃避潜伏期记为２min。历时6d，每天１次。②空间探索试验（spatial probetest）：定位航行试验结束后撤出平台，然后任选一相同入水点将大鼠放入水中，测其２min内跨原平台及其他３个象限相应平台位置的次数。血浆ＥＴ含量测定各组大鼠于水迷宫检测后取样，眼眶采血，每mL加入０.３mol/Ｌ抗凝剂乙二胺四乙酸二钠（EDTA Na2+）2μL和抑肽酶500kU，４℃温度下立即离心，3500r/min离心15min，取上清液低温保存，采用放射免疫法（ＲＩＡ）测定，在广州中医药大学核医学中心测试，操作按照试剂盒说明进行。 采用ＳＰＳＳ13.0for windows统计软件。