[发明专利]一种虫草花多糖的提取方法

说明书

本发明提供了一种虫草花多糖的提取方法，所述的提取方法包括如下步骤：粉碎、水提、一次醇沉、酶解、脱蛋白、二次醇沉、超滤、柱层析；本发明提取方法产品回收率高、纯度好，虫草花多糖得率大于1.8％，多糖的纯度大于90.0％；本发明提取方法工艺简单，所用试剂易得，生产成本低，易于实现工业化。

(一)技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种从虫草花中提取多糖的方法。

(二)背景技术

“虫草花”并非花，实质上是虫草子实体，而不是冬虫夏草子实体。培养基是仿造天然虫子所含的各种养分，包括谷物类、豆类、蛋奶类等，属于一种真菌类。与常见的香菇、平菇等食用菌很相似，只是菌种、生长环境和生长条件不同。为了跟冬虫夏草区别开来，商家起了一个美丽的名字，把它叫做“虫草花”，虫草花外观上最大的特点是没有了“虫体”，而只有橙色或者黄色的“草”。

虫草多糖是非特异性的免疫调节剂，具有抗肿瘤、抗炎症、抗凝血、抗病毒、抗放射、降血糖、降血脂等多种功能。多糖是虫草中最重要、最丰富的生理活性物质之一。虫草多糖被认为是虫草具有双向免疫调节的药效成分，有抗肿瘤、抗炎、降血糖、降血脂等功效。虫草多糖甚至对艾滋病毒有直接的抑制作用，并且有望成为阻止艾滋病毒携带者表现症状的药物。此外虫草多糖在日用化妆品方面，在食品工业、发酵工业及石油工业等行业上也有着广泛的应用。

目前市场上真菌多糖产品很多，但是未见有虫草花多糖的产品，更没有专门针对虫草花多糖的提取方法。

(三)发明内容

本发明提供了一种虫草花多糖的提取方法，该方法综合了水提醇沉法、超声波促进和膜分离技术的长处，摒弃了单一方法的高品质和低成本难以融合的缺点，既能保持多糖结构破坏少、纯度高、提取率高、达到多级分离的效果，又能减少能耗降低加工成本。

本发明采用如下技术方案：

一种虫草花多糖的提取方法，所述的提取方法按如下步骤进行：

(1)粉碎：将干燥的虫草花进行粉碎并过筛，得到虫草花粉末；

步骤(1)中，所述过筛的筛孔为80～120目；

(2)水提：将步骤(1)所得虫草花粉末与蒸馏水以料液质量比1：20～80混合，加热煮沸2～3h，并辅以超声波辅助提取，之后离心10～15min，取上清液，离心所得残渣重复水提3～4次，合并各次所得上清液，浓缩至原体积(即浓缩操作前的初始体积)的1/4～1/10，得到多糖提取液；

步骤(2)中，所述超声波的功率为500W，频率为20KHz；所述离心的速率为8000～10000rpm；所述的浓缩采用60～80℃下旋蒸的方式浓缩；

(3)一次醇沉：温度4～25℃下，将步骤(2)所得多糖提取液与食用酒精以体积比1：1.5～4混合，进行醇沉24～30h，沉淀析出，离心10～15min，取离心所得固体物质重复醇沉2～3次，得到粗多糖；

步骤(3)中，所述离心的速率为8000～10000rpm；所述离心所得固体物质重复醇沉的方法为：将固体物质用30～40质量倍的水溶解，得到溶解液，再将所得溶解液与食用酒精以体积比1：1.5～4混合，进行醇沉24～30h，沉淀析出，离心10～15min得到固体物质，如此重复醇沉2～3次，得到粗多糖；

(4)酶解：将步骤(3)所得粗多糖溶于30～40质量倍的蒸馏水中，用Na2CO3水溶液调节pH值为7.2～7.8，得到粗多糖溶液，加入胰蛋白酶、甲苯，在35～37℃下恒温水解18～24h，之后浓缩至原体积(即浓缩操作前的初始体积)的1/4～1/2，得到蛋白酶解液；