[发明专利]一种高流通性亲和层析介质

说明书

本案涉及高流通性亲和层析介质，其以大孔二氧化硅微球为内核，在大孔二氧化硅微球孔道内填充有甲基丙烯酸环氧丙酯、多聚糖、偏铝酸钠，所述介质二氧化硅微球表面一部分键合有寡糖分子，剩余部分连接蛋白A配基；本发明所提供的亲和层析介质骨架牢固，具有更高的机械强度和耐压性能，配基与内核连接紧密，流通性大，对目标蛋白的分离效果好、效率高。

技术领域

本发明涉及一种层析介质，具体涉及一种高流通性亲和层析介质。

背景技术

蛋白质存在于一切生物体中，是非常重要的大分子，作为生物功能的执行者，蛋白质担负着生物催化、物质运输、运动、防御、调控及记忆识别等多种生理功能。然而无论是对蛋白质开展深入研究，还是将功能蛋白制备成生物药品，都需要用到高纯的蛋白质，因此蛋白质分离与纯化技术是生物产业中的核心技术。其中层析法是用于分离纯化蛋白质的重要技术之一，包括亲和层析、吸附层析、凝胶过滤层析、离子交换层析、等电聚焦层析等。

近些年来亲和层析技术发展迅猛，在功能药物蛋白的分离纯化中表现出巨大的优越性，在生物制药领域实现了产业化应用。固相基质、功能性配基和起连接作用的间隔臂是组成亲和层析介质最重要的三个部分，粒径及其分布、流通性能、孔道结构、载量及分离效率等指标是评价亲和层析介质性能的重要依据。其中，流通性能是指流动相穿过介质的性能，具有高流通性的层析介质骨架牢固，同时具有更高的机械强度和耐压性能，可以提高蛋白质分离纯化的效率。现有的亲和层析介质由于配基与基质的连接不牢固、介质孔道结构不均匀、非特异性吸附较多等问题，导致层析介质的流通性低下，分离效率和效果较差。

发明内容

针对现有技术的不足之处，本发明的目的在于提供一种耐高压亲和层析介质。

本发明的技术方案概述如下：

以大孔二氧化硅微球为内核；所述大孔二氧化硅微球孔道内填充有甲基丙烯酸环氧丙酯、多聚糖、偏铝酸钠；所述介质二氧化硅微球表面一部分键合有寡糖分子，剩余部分连接蛋白A配基；所述偏铝酸钠以氢氧化铝溶于0.1mol/L的氢氧化钠溶液中的形式存在。

优选的是，所述甲基丙烯酸环氧丙酯、多聚糖、偏铝酸钠三种组分的质量比为：

甲基丙烯酸环氧丙酯 60～70wt％；

多聚糖 30～35wt％；

偏铝酸钠 2～3wt％；

三者用量的和为100wt％。

优选的是，所述大孔二氧化硅微球的粒径为30～50μm，孔径为200～300nm。

优选的是，所述多聚糖的聚合度为20～30。

优选的是，所述寡糖分子由2～10个同类型或者不同类型单糖分子缩聚而成；所述单糖分子包括五碳醛糖和六碳醛糖。

优选的是，所述寡糖分子与配基按照物质的量之比为1∶0.04～0.05配比。

本发明的有益效果是：本案选用大孔径的大孔二氧化硅微球作为内核，能够增大层析介质内核的表面积，在孔隙中填充甲基丙烯酸环氧丙酯能够活化内核，使内核能够与基质相连，同时该活化分子在内核的孔隙之中是亲和介质的结构更加紧促牢固；多聚糖能够增加二氧化硅微球的生物相容性，使蛋白质载量增多；偏铝酸钠溶液能够填充入二氧化硅微球的孔道内，然后调整溶液pH值，在孔道能形成氢氧化铝固体固架，可以提高介质的机械强度和耐压性能，使流通性能增大；将配基与寡糖分子混合后一同键合于层析介质基质表面上，并选用合适的两者比例，可以增大配基与基质的连接强度；本发明所提供的亲和层析介质骨架牢固，具有更高的机械强度和耐压性能，配基与基质的连接牢固，流通性大，对目标蛋白的分离效果好、效率高。

具体实施方式