[发明专利]一种检测降钙素的试剂盒及检测方法

说明书

本发明提供一种检测降钙素的试剂盒，该试剂盒包含试剂R1、试剂R2，其中试剂R1中包含0.5‑24μg/mL包被于磁微粒的重组鼠抗人降钙素单克隆Fab抗体，试剂R2中包含0.05‑10μg/mL标记的抗人降钙素抗体，本发明还提供该试剂盒的检测方法。本发明的试剂盒灵敏度高、线性范围宽、有效的避免了PCT的干扰。

技术领域

本发明涉及免疫分析领域，特别是涉及一种检测降钙素的试剂盒及检测方法。

背景技术

降钙素原(procalcitionin，PCT)是一种由116个氨基酸组成、分子量为13kDa的糖蛋白，在人体内半衰期约为20-24小时，稳定性好。正常条件下，PCT在甲状腺C细胞中生成并裂解成降钙素，人血清PCT含量极低，约2.5pg/ml。当严重细菌、真菌、寄生虫感染以及脓毒症和多脏器功能衰竭时，PCT在血浆中的水平升高。自身免疫、过敏和病毒感染时PCT不会升高。局部有限的细菌感染、轻微的感染和慢性炎症不会导致PCT升高。PCT作为一种新的、具有创新意义的严重细菌感染等疾病的实验指标，PCT提高了临床诊断的准确性，为重症监护、放化疗、服用免疫抑制剂或器官移植等患者合并发热时提供了及其重要的诊断、进一步的检查和治疗的临床依据，PCT可广泛应用于ICU病房、血液科、肿瘤科、儿科、早产儿及新生儿监护室、外科、内科、器官移植科、急诊科、介入诊断和治疗实验室等。

降钙素(calcitonin,CT)是甲状腺的滤泡旁细胞(明亮细胞或C细胞)产生和分泌，它由32个肽组成，它在1，7位上半胱氨酸之间有一个二硫键，分子量约为3418，主要由甲状腺的滤泡旁细胞(C细胞)分泌。它在肝脏和肾脏中代谢，受血清钙水平调节，主要功能是抑制破骨细胞的骨吸收,降低血钙的水平，防止钙应激(例如妊娠、哺乳和生长)时的骨丢失。正常人血清降钙素浓度为10～20pg/mL。

降钙素含量的测定对于骨质疏松的评估、监测甲状腺功能具有重要意义。降钙素水平的升高可见于各种病理学状况，伴有降钙素无序大量分泌的最显著临床病症是甲状腺髓质癌(MTC)。该病发病率低，但致死率高，可能为散发性，也可能是常染色体显性遗传病。通过检测血清降钙素水平，可以对MTC进行早期诊断，从而使得早期亚临床疾病的完全治愈成为可能，血清降钙素水平还是观察和评价治疗疗效，以及预后的重要指标。

降钙素水平的异常升高还可见于肺癌，特别是小细胞肺癌、乳腺癌、神经嵴起源的肿瘤、甲状旁腺功能亢进、高胃泌素血症、肾衰和慢性炎性疾病。

目前，常用的检测方法是免疫学检测，免疫学检测是基于抗原和抗体的特异性反应进行检测的一种手段，其可以利用同位素、酶、化学发光物质等对被检测信号进行放大和显示，因此常被用于检测蛋白质，激素等生物活性物质。免疫学检测经历了放射免疫检测、酶联免疫检测以及光生物学标记免疫检测技术三个阶段，使免疫学检测向着敏感性、准确性以及操作简捷性的方向发展。

化学发光免疫分析是近年来在世界范围内发展非常迅速的非放射性免疫分析技术。检测原理是以发光物质作为信号放大系统并借助其发光强度直接测定免疫结合。该方法灵敏度高、检测范围宽，是免疫学检测重要的发展方向。

由于CT的氨基酸序列是PCT的氨基酸序列的60-91部分，所以CT的检测容易受到PCT的交叉干扰，目前CT的检测多采用双抗体夹心法，该方法易受类风湿因子(RF)等物质的干扰。

发明内容

为解决现有技术中存在的问题，本发明提供采用识别降钙素N端或者C端的抗人降钙素抗体，有效的避免了PCT的干扰，本发明采用重组鼠抗人降钙素单克隆Fab抗体，有效的避免了RF因子这类与Fc片段结合导致的干扰，而且本发明的检测降钙素的试剂盒灵敏度高、线性范围宽、抗干扰能力强。

为实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供的检测降钙素的试剂盒，所述试剂盒包含：

试剂R1：