[发明专利]一种不同时间点6‑BA处理抑制培苗不定根发生的方法

说明书

技术领域

本发明属于经济作物种植技术领域，尤其涉及一种不同时间点6-BA处理抑制培苗不定根发生的方法。

背景技术

不定根是植物按非正常的时序发生且发生部位不定的根，多发生于茎杆、叶子或下胚轴等器官。不定根的产生多半是因为植物的器官或组织受到伤害、激素或生物胁迫等刺激，而由根原始体经过细胞分裂、分化发育为根原基，再由根原基发育而成。此研究中组培苗可能是收到受伤以及激素信号，不定根从茎段中产生而来。根据前人的研究，不定根发生可以分为三个阶段：不定根诱导阶段，不定根原基形成阶段以及不定根产生阶段。6-BA是第一个人工合成的细胞分裂素，6-BA在植物体内移动性差，它的生理功能在处理部位及附近发挥作用，用6-BA处理组培苗有利于提高实验的准确性。很多研究已经表明细胞分裂素抑制不定根的产生，但是细胞分裂素在不定根发育的哪个时期起抑制作用并不清楚。在此研究中，确定细胞分裂素在不定根发育的哪个时期起抑制作用可以通过降低此阶段的细胞分裂素含量来促进不定根产生，有利于矮化砧木的无性繁殖，培养易生根的苹果砧木材料。而现有的技术都集中在促进不定根发生机制上，诱导不定根的方法比较单一。

综上所述，现有技术存在的问题是：现有的技术集中在促进不定根的产生，方法较为单一。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种不同时间点6-BA处理抑制培苗不定根发生的方法。

本发明是这样实现的，一种不同时间点6-BA处理抑制培苗不定根发生的方法，所述不同时间点使用人工合成的细胞分裂素6-BA处理抑制培苗不定根发生的方法，苹果砧木M26组培苗在3d和7d转移至抑制生根培养基中培养；6-BA处理浓度2mg/L，培养至20d。

进一步，所述苹果砧木M26组培苗初代培养：在大田中选择生长健壮无病虫害的母株，于3月份取一年生枝，放置温室水培，当枝条上的芽长至1.5-2cm时剪取嫩芽，去除舒展叶片，将茎尖在自来水下冲6-8h，将芽取出并置于广口瓶，在超净工作台中进行消毒接种；材料进行消毒处理，首先用75％酒精处理2s，然后置于0.1％升汞溶液处理7min，再用灭菌蒸馏水冲洗4～5次，将芽清洗干净。消毒后的嫩芽接种到MS+6-BA 0.6mg/L+IBA 0.1mg/L+PVP。

进一步，所述苹果砧木M26组培苗继代培养，在超净工作台中将M26组培苗从初代培养基转移至继代培养基。

进一步，所述苹果砧木M26组培苗处理之前需要组培苗在扩繁培养基培养一个月后，选取高度达到1.5cm的苹果砧木M26组培苗从扩繁培养基中取出，转移至生根培养基。

进一步，所述扩繁培养基为MS培养基，由IBA 0.1mg/L，6-BA 0.6mg/L，琼脂8g/L和蔗糖30g/L组成，pH为5.8。

进一步，所述生根培养基由1/2MS培养基，IBA 1mg/L组成，pH为5.8。

进一步，抑制生根培养基由1/2MS培养基，IBA 1mg/L，6-BA 2mg/L组成，pH为5.8。

进一步，所述苹果砧木M26组培苗培养室光照16h/d、光照2000lux，温度为25℃，平均湿度为70％–80％。

本发明的另一目的在于提供一种所述抑制苹果砧木M26组培苗不定根发生的方法，有利于选育容易生根的矮化砧木，对我国苹果矮化砧木的繁育具有重要作用。

本发明能够确定CK抑制不定根发生的时期的问题，为CK抑制不定根发生机理，矮化砧木主要是通过无性繁殖方式进行繁殖，本发明不定根发生的抑制机理，有利于选育容易生根的矮化砧木，对指导实际生产具有十分重要的意义。本发明发现在3d转移至抑制生根培养基中培养，抑制生根培养基中含2mg/L6-BA，培养20d后没有不定根的产生；7d转移至抑制生根培养基中培养20d后有部分不定根产生。本发明表明CK抑制不定根发生主要在转移至抑制生根培养基3-7d。

附图说明

图1是本发明实施例提供的不同时间点6-BA处理抑制培苗不定根发生的方法流程图。

图2是本发明实施例提供的不同时间点6-BA处理生根率统计示意图，差异分析P<0.05。

图3是本发明实施例提供的不同时间点6-BA处理不定根数目统计示意图，差异分析P<0.05。

图4是本发明实施例提供的不同时间点6-BA处理不定根长度统计示意图，差异分析P<0.05。

具体实施方式