[发明专利]一种白果组培快繁方法

说明书

技术领域

本发明涉及农业生物技术中植物组织培养的方法，具体地说，涉及一种白果组培快繁方法。

背景技术

白果又名：灵眼、佛指柑、佛指甲。属落叶乔木，高可达30米。树干直立，树皮灰色。叶在短枝上簇生，在长枝互生。叶片扇形，先端中间2浅裂，基部楔形，叶脉平行，叉形分枝；叶柄长2~7厘米。花单性，雌雄异株；雄花呈下垂的短柔荑花序，有多数雄蕊，花药2室，生于短柄的顶端；雌花每2~3个聚生于短枝枝上，每花有一长柄，柄端两叉。各生1心皮，胚珠附生于上，通常只有1个胚珠发育成熟。种子核果状态，倒卵形或椭圆形，淡黄色，被白粉状蜡质；外种皮肉质，有臭气；内种皮灰白色，骨质，两侧有棱边；胚乳丰富，子叶2。花期4~5月，果期7~10月。秋冬之际采收成熟果实，堆放地上，或浸入水中，使肉质外种皮腐烂，洗净，晒干。白果生长于全国大部分地区，性寒，味甘。具有剑肺气，定喘咳，缩小便。目前,国内市场上白果销量大。因此，合理地开发利用白果资源,必将产生良好的生态效益、经济效益和社会效益。目前，未见国外学者对白果进行研究报道,国内在种子萌发、生物量等方面有一些零散的研究，对其无性繁殖技术研究更是未见报道。因此,为促进白果繁衍生息,建立白果无性繁殖体系是很有必要的，白果良种快繁和规模生产发展也具有重要的现实意义和明显的经济效益、社会效益和生态效益。

发明内容

本发明的目的在于提供出一种以带芽茎段为外植体，经过诱导培养、继代培养、生根以及炼苗移栽等过程成功地获得了白果离体再生植株,建立了白果的离体快速繁殖技术体系，达到种子种苗纯，繁殖快，收益高。

本发明的一种白果组培快繁方法，其特征在于包括以下的步骤：

（1）诱导培养：采集白果优株根部当年生幼嫩萌芽条,剪取顶部茎段作为外植体,将外植体先用洗洁精浸泡5h,同时用软毛刷刷洗表面的柔毛,再用自来水冲洗2h，茎剪成0.8cm、带4个腋芽的茎段,在超净工作台上，用80%乙醇溶液中消毒32s，再用0.1%升汞浸泡22min，无菌水冲洗10次，接种至诱导培养基中进行不定芽诱,接种后置于每天光照16小时，光照强度为1900lx，置于培养温度为29℃的条件下培养直至形成不定芽；

（2）继代培养：将步骤（1）培养后长出的嫩芽从基部剪下并转入增殖培养基上进行增殖培养，接种后先在29℃条件下全暗培养5天，然后置于每天光照10小时，光照强度为3500lx，置于培养温度为29℃的条件下培养，每25天继代一次；

（3）生根培养：将步骤（1）或（2）的芽苗长至3cm高时，切割成单芽并接种到生根培养基上进行诱导生根，接种后置于每天光照18小时，光照强度为2900lx，培养温度为29℃的条件下培养至生根；

（4）炼苗移栽：将长至5cm的生根试管苗的培养瓶瓶盖半打开在培养室中炼苗5天后，培养瓶瓶盖全打开在室外于自然光照下炼苗6天后将试管苗从培养瓶中取出，洗掉根部培养基，尽量不伤害根部，栽入由泥炭土:黄泥土=2：1混合成的基质中并移栽定植于地块，移栽31天内保持空气湿度80%以上。

步骤（1）所述的诱导培养基为：MS+8.3mg/L 6-BA+4.6mg/L NAA+32g/L蔗糖+7.0g/L琼脂，pH为5.9。

步骤（2）所述的增殖培养基为：MS+1.4mg/L NAA+7.0mg/L 6-BA+32g/L蔗糖+7.0g/L琼脂，pH为5.9。

步骤（4）所述的生根培养基为：1/2MS+3.1mg/L IBA+2.5mg/L ABT₁+33g/L蔗糖+7.0g/L琼脂，pH为5.9。

本发明的优点是：白果性寒，味甘。具有剑肺气，定喘咳，缩小便的功效。为促进白果繁衍生息，很有必要建立白果的离体快速繁殖技术体系。本发明以带芽茎段为外植体，经过诱导培养、继代培养、生根以及炼苗移栽等过程成功地获得了白果离体再生植株,建立了白果的离体快速繁殖技术体系，对于白果良种快繁和规模生产发展具有重要的现实意义，和具有明显的经济效益、社会效益。

具体实施方式

以下实施例是对本发明的进一步说明，不是对本发明的限制。

实施例1