[发明专利]一种血管内皮因子检测试剂盒及其使用方法

说明书

技术领域

本发明涉及医学检验技术领域，尤其涉及一种血管内皮因子检测试剂盒及其使用方法。

背景技术

血管内皮生长因子(英文：vascular endothelial growth factor，简称：VEGF)，早期亦称作血管通透因子(英文：vascular permeability factor，简称：VPF)，是血管内皮细胞特异性的肝素结合生长因子(heparin-binding growth factor)，可在体内诱导血管新生(induce angiogenesis in vivo)。该因子能有效的促进血管再生，对医疗研究由重要作用。

目前，检测血管内皮因子的方法主要还是放射免疫分析法，但众所周知，放射免疫分析法具有一定的放射性污染，且应用仪器比较昂贵。

因此，目前急需一种无污染、操作成本低的血管内皮因子检测试剂盒。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供了一种无污染、操作成本低的血管内皮因子检测试剂盒及其使用方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：一种血管内皮因子检测试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：

试剂R1：

试剂R2：

所述胶乳包被的血管内皮因子多克隆抗体的原料成分为：胶乳微球、血管内皮因子多克隆抗体和聚乙烯对氯甲基苯乙烯共聚物，其中，聚乙烯对氯甲基苯乙烯共聚物在整体试剂R2中的含量为9％-11％。

作为本发明的优选方式之一，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：

试剂R1：

试剂R2：

所述胶乳包被的血管内皮因子多克隆抗体的原料成分为：胶乳微球、血管内皮因子多克隆抗体和聚乙烯对氯甲基苯乙烯共聚物，其中，聚乙烯对氯甲基苯乙烯共聚物在整体试剂R2中的含量为10％。

作为本发明的优选方式之一，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：

试剂R1：

试剂R2：

所述胶乳包被的血管内皮因子多克隆抗体的原料成分为：胶乳微球、血管内皮因子多克隆抗体和聚乙烯对氯甲基苯乙烯共聚物，其中，聚乙烯对氯甲基苯乙烯共聚物在整体试剂R2中的含量为10.5％。

作为本发明的优选方式之一，所述试剂R1的Tris缓冲液的pH为7.5。

作为本发明的优选方式之一，所述试剂R2的Tris缓冲液的pH为7.5。

一种血管内皮因子检测试剂盒的使用方法，包括如下步骤：

(1)将待测样品与试剂R1混合，37℃孵育5min；

(2)用全自动生化分析仪测定反应后的吸光度A1；

(3)再与试剂R2混合，37℃反应5min；

(4)用全自动生化分析仪测定反应后的吸光度A2；

(5)根据吸光度变化值计算出样本中血管内皮因子的浓度。

作为本发明的优选方式之一，所述步骤(1)的试剂R1和步骤(3)的试剂R2的体积比为3:1。

作为本发明的优选方式之一，所述步骤(1)的待测样品与试剂R1和试剂R2构成的试剂液之间的体积比为1:50。

作为本发明的优选方式之一，所述步骤(2)和步骤(4)中，在波长600nm处测定吸光度A1和A2。

作为本发明的优选方式之一，所述步骤(5)中，吸光度变化值为ΔA，即A2减去A1后的值。

本发明相比现有技术的优点在于：

(1)本发明试剂盒具有较高的检测灵敏度，操作简单、快速，从检测到出结果只需10分钟；

(2)本发明所形成的抗原抗体复合物，稳定性佳，在特定波长下有一定的吸光度，特异性强；

(3)本发明可用于全自动生化分析仪上，适合全自动测试，可大规模的开展和推广。

具体实施方式

下面对本发明的实施例作详细说明，本实施例在以本发明技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本发明的保护范围不限于下述的实施例。

实施例1

本实施例的一种血管内皮因子检测试剂盒，包括彼此独立的试剂R1和试剂R2双液体组分，包括的成分及相应含量为：