[发明专利]一种腹腔注射法建立恒河猴肝纤维化模型的方法

说明书

本发明提供了一种腹腔注射法建立恒河猴肝纤维化模型的方法，包括以下步骤：选取2‑3岁，体重为5‑9kg的雄性恒河猴作为模型动物，造模过程中喂养高脂饲料，饮用体积浓度为9％‑11％的酒精水溶液，并且在造模过程中向每只恒河猴注射CCl₄注射液，每周注射2次，每次注射量为0.8‑1.5mL/kg，注射方式为腹腔注射，持续20‑30周，造模成功。本发明动物模型的建立，其方法简单，且安全可靠，建模时间短，成功率高，重复性好，动物耐受性好，死亡率低，可以用来研究慢性肝病的发生机制、致病因素和治疗手段。

技术领域

本发明属于动物模型构建技术领域，具体涉及一种腹腔注射法建立恒河猴肝纤维化模型的方法。

背景技术

慢性肝病是危害人群健康的重大疾病。我国有上亿人口携带肝炎病毒，在此基础上，环境污染、粮食霉变、泛用食品添加剂以及酒精性和非酒精性过度饮食等因素相互叠加，导致炎症反应、脂肪肝、肝纤维化、其中每年有数百万人演变成肝硬化和肝癌，造成巨大的社会和家庭负担。目前传统的临床药物治疗不能改善终末期肝病的预后，而全球性供体器官的严重短缺，供需矛盾(供:需/1:200)的日益突出，使大多数患者只能在等待的过程中死亡。因此在供体器官严重短缺与终末期肝病病人治疗需求矛盾日益突出的今天，如何拓展新的器官源、或开辟新的替代疗法是我们当前面临的挑战和亟待解决的问题。因此探讨慢性肝病的发病机制、致病因素、治疗手段是根本解决慢性肝病的有效途径，然而理想的动物模型又是其中的关键。

目前应用比较广泛的肝纤维化动物模型有化学性肝纤维化模型、酒精性肝纤维化模型、免疫性肝纤维化模型、胆管阻塞性肝纤维化模型和复合因素性肝纤维化模型，而鼠类及其他常用小动物模型是很成熟和方便的动物模型，但是由于鼠类及其它小动物与人类之间存在很大的遗传背景和生理差距，其构建的模型很难直接与人类的疾病相对应。目前，有实验证实利用一些小鼠模型得到关于疾病机理的研究和人类同样的疾病机理并不相同。灵长类动物的应用始自20世纪初，直至1960年后才用于普通研究机构。这是因为，灵长类动物在亲缘关系上和人类最接近,在组织结构、免疫、生理和代谢等方面与人类高度近似，与人类的遗传基因有75％～98.5％的同源性，是研究人类健康和疾病的理想动物模型，其应用价值远超过其他种属的动物。近年来实验猴动物模型研究广泛被应用于传染病、内分泌疾病、心血管疾病、老年性疾病、生殖生理等病理研究，为更清楚的揭示人类疾病致病机理以及筛选合适的治疗手段和药物提供了很好的研究平台。选择动物模型是关键，大动物实验是嫁接转化医学(from the bench to bedside)之间的桥梁。因此，寻找一种方法简单，成功率高，重复性好且动物耐受性好，死亡率低的建模方法是亟待解决的问题。

发明内容

针对现有技术中存在的上述问题，本发明提供一种腹腔注射法建立恒河猴肝纤维化模型的方法，其造模时间短、造模成功率和造模效率高，且动物耐受性好、死亡率低。

为实现上述目的，本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种腹腔注射法建立恒河猴肝纤维化模型的方法，包括以下步骤：选取2-3岁，体重为5-9kg的雄性恒河猴作为模型动物，造模过程中所用饲料为高脂饲料，体积浓度为9％-11％的酒精水溶液作为唯一饮用水，并且在造模过程中向每只恒河猴注射CCl₄注射液，每周注射2次，每次注射量为0.8-1.5mL/kg，注射方式为腹腔注射，持续20-30周，造模成功。

进一步地，高脂饲料包括以下重量百分数的组分：粗蛋白16％-18％、粗脂肪21％-23％、水9.5％-11.5％、灰分6.5％-7.0％、粗纤维3％-4％、钙0.9％-1.0％、磷0.7％-0.8％、胆固醇0.3％-0.4％。

进一步地，高脂饲料包括以下重量百分数的组分：粗蛋白16.78％、粗脂肪21.35％、水10％、灰分6.8％、粗纤维3.2％、钙0.92％、磷0.71％、胆固醇0.32％。

进一步地，酒精水溶液中酒精的体积浓度为10％。