[发明专利]一种荧光免疫层析法检测试剂盒及其检测方法

说明书

本发明涉及一种荧光免疫层析法检测试剂盒及其检测方法，试剂盒包括层析试纸和检测液，层析试纸包括基板，附着于基板上的承载体，承载体包括第一区域、第二区域及第三区域，第一区域、第三区域分别位于第二区域两侧，在第一区域和第二区域相交处形成检测带，第二区域和第三区域相交处形成质控带，层析试纸还包括贴合到承载体第一区域的结合垫和贴合到结合垫的样品垫，及贴合到第三区域的吸水纸；检测液包括单克隆抗体T1、单克隆抗体T2以及稀释液。本发明的检测试剂盒灵敏度高、稳定性好，而且通用性强，在PCT、cTnI、CK‑MB、BNP等荧光免疫层析法检测中均可应用。

技术领域

本发明涉及一种试剂盒，尤其涉及一种荧光免疫层析法检测试剂盒及其检测方法，属于医学免疫学中荧光免疫层析技术领域。

背景技术

免疫层析法是近几年来国外兴起的一种建立在层析技术和抗原-抗体特异性免疫反应基础上的一项新型免疫检测技术，其原理是将特异的抗体先固定于条状纤维层析材料的某一区带，当该干燥的条状纤维层析材料的一端浸入测试样品后，由于毛细管作用，待测物在层析条上移动，当移动至固定有抗体的区域时，待测物中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合，若用免疫胶体金或免疫酶染色可使该区域显示一定的颜色，从而实现特异性的免疫诊断。

荧光免疫层析法是基于免疫层析的基础上，采用荧光标记抗体，配套荧光检测仪，实现对检测结果的智能化运算，可减少人工检测的误判，提高检测灵敏度。而且，荧光免疫层析法操作简单、耗时短，只需加样即可智能读取检测结果。因而近年来该技术发展迅速，已经广泛用于小型医疗机构临床检测、分析和诊断。

发明内容

本发明的目的是提供一种灵敏度高、稳定性好且资源利用率高的荧光免疫层析法检测试剂盒。

本发明的目的可通过下列技术方案来实现：一种荧光免疫层析法检测试剂盒，包括

层析试纸：所述层析试纸包括基板，附着于基板上的承载体，所述承载体包括第一区域、第二区域及第三区域，所述第一区域、第三区域分别位于第二区域两侧，在第一区域和第二区域相交处形成检测带，第二区域和第三区域相交处形成质控带，所述层析试纸还包括贴合到所述承载体第一区域的结合垫和贴合到所述结合垫的样品垫，及贴合到第三区域的吸水纸；

检测液：所述检测液包括单克隆抗体T1、单克隆抗体T2以及稀释液。

在上述的一种荧光免疫层析法检测试剂盒中，所述承载体包括但不限于硝酸纤维素膜，所述基板包括但不限于PVC板。

在上述的一种荧光免疫层析法检测试剂盒中，所述吸水纸自第三区域的边缘向第二区域方向延伸预设长度。

在上述的一种荧光免疫层析法检测试剂盒中，所述结合垫自第一区域的边缘向第二区域方向延伸预设长度，所述样品垫自结合垫的边缘向第一区域方向延伸预设长度。所述结合垫包括但不限于聚酯纤维，所述样品垫包括但不限于玻璃纤维膜。

在上述的一种荧光免疫层析法检测试剂盒中，所述单克隆抗体T1和单克隆抗体T2为不同种的单克隆抗体。

在上述的一种荧光免疫层析法检测试剂盒中，所述单克隆抗体T1和单克隆抗体T2中的任一抗体为生物素交联的单克隆抗体，抗体和生物素的交联可保证抗体的高特异性和高亲和力。

生物素需进行活化，活化的生物素表面含有稳定的活性酯，之后加入需要交联的抗体，活性酯可以与抗体上的氨基缩合成为稳定的酰胺键，得到生物素标记的抗体。由于抗体的空间折叠方式和Fc端疏水性强，因此偶联反应绝大多数发生在Fc端，对抗体与抗原的结合影响不大；且生物素为小分子，不会由于空间位阻影响抗原抗体的结合。