[发明专利]一种鉴别化妆品原料中拉瑞阿提取物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及分析检测技术领域，具体涉及一种鉴别化妆品原料中拉瑞阿提取物的方法。

背景技术

拉瑞阿提取物为化妆品原料，是由蒺藜科拉瑞阿属植物极叉开拉瑞阿(Larrea divaricata)、墨西哥拉瑞阿(L.mexicana)和三指拉瑞阿(L.tridentata)的叶提取制备而得。前者主产于南美洲的阿根廷，后两者主要产于北美洲西部美国和墨西哥交接沙漠处。我国主要是进口该提取物原料作为化妆品配方中抗菌剂、抗炎剂、抗氧化剂和减肥剂，国家标准和行业中目前均暂无拉瑞阿提取物的鉴别检测方法，因此亟需开发一种简单、准确的拉瑞阿提取物的鉴别检测方法来监控该原料质量。

拉瑞阿提取物中含有去甲二氢愈创木酸这一木质素类活性成分和芫花素等若干黄酮类活性化合物，而自然界中含去甲二氢愈创木酸的植物较少，仅其同科愈创木属植物愈创木中含有去甲二氢愈创木酸成分，并且愈创木主要含有挥发油愈创木醇和布黎醇、非挥发类成分五味子素类木脂素类，以及二氢愈创木酸三萜皂苷和葡萄糖苷类成分，且其并不含有芫花素等任何黄酮类成分。因此可通过对去加二氢愈创木酸和芫花素这两个成分的检测对拉瑞阿提取物进行鉴别。

现有技术所公开的检测去甲二氢愈创木酸方法：陶凌晖,陈攀,徐长荣等,高效液相色谱法测定去甲二氢愈创木酸的含量及其有关物质[J].第三军医大学学报,2007,29(12):1148-1151。该现有技术方法使用高效液相色谱仪外检测器，采用ZorbaxSB-C18色谱柱(4.6mm×250mm,5um),检测波长为282nm，该现有技术方法以三氟醋酸-水(0.05∶100)流动相A，以三氟醋酸-乙腈(0.05∶100)为流动相B,洗脱梯度:0～15min。该现有技术方法用于合成去甲二氢愈创木酸及其有关杂质的含量测定效果不错，然由于天然拉瑞拉提取物除含有去甲二氢愈创木酸物质外，还存在其他功效物质(如芫花素)和其他杂质，并且通过对去甲二氢愈创木酸和芫花素进行紫外吸收扫描可得知，去甲二氢愈创木酸和芫花素的最大吸收波长不同，280nm时芫花素紫外吸收较弱，故该波长条件无法检测出芫花素，因此该现有技术方法无法检测分析出芫花素因此无法确认所测产品中含有拉瑞阿提取物。

发明内容

因此，本发明要解决的技术问题在于克服现有技术中的方法无法同时检测分析出去甲二氢愈创木酸和芫花素进而无法确认待测物中是否含有拉瑞阿提取物的缺陷，从而提供一种鉴别化妆品原料中拉瑞阿提取物的方法。

本发明的技术方案是基于拉瑞阿提取物中含有去甲二氢愈创木酸这一木质素类功效成分和芫花素黄酮功效成分建立，通过高效液相色谱仪检测是否同时含有这两种物质来实现定性检测鉴别和质量稳定性控制。

为此，本发明提供如下技术方案：

一种鉴别化妆品原料中拉瑞阿提取物的方法，采用高效液相色谱法进行检测，检测波长为210nm。

色谱条件为：色谱柱为Phenomenex Luna C18柱、250mm×4.6mm×5um；以0.2％磷酸-乙腈为流动相进行梯度洗脱，梯度比例如下：0～3min0.2％磷酸与乙腈的比例为70:30、15min 0.2％磷酸与乙腈的比例为55:45、35min 0.2％磷酸与乙腈的比例为40:60、45～50min 0.2％磷酸与乙腈的比例为20:80；流速为1.0mL/min；柱温为25℃；进样量为20μL；190-400nm全扫描。

所述的方法，包括如下步骤：

(1)前处理：用水溶解样品，并用50％乙醇稀释配置成0.2g/ml的溶液，再经0.45um滤膜过滤，供高效液相色谱仪测定；

(2)使用去甲二氢愈创木酸标准品，以50％乙醇为溶剂配置去甲二氢愈创木酸标准溶液I，II，III，IV，V，利用高效液相色谱仪检测，得到去甲二氢愈创木酸溶液中去甲二氢愈创木酸的峰面积，并生成去甲二氢愈创木酸标准曲线；

(3)使用芫花素标准品，以无水甲醇为溶剂配置芫花素标准溶液I，II，III，IV，V，利用高效液相色谱仪检测，得到芫花素溶液中芫花素的峰面积，并生成芫花素标准曲线。

所述去甲二氢愈创木酸标准溶液I，II，III，IV，V按如下方法配置：

称取去甲二氢愈创木酸标准品用50％乙醇(V/V)定容至20ml，配置得2.5mg/ml标准储备液；

取1mL去甲二氢愈创木酸标准储备液用50％乙醇(V/V)稀释并定容至20mL，配置得去甲二氢愈创木酸标准溶液I；