[发明专利]一种六环生物碱类化合物及其制备和应用

说明书

本发明涉及抑菌剂领域，具体地说是一种海藻内生真菌来源的天然六环生物碱类化合物及其制备方法和在抑菌方面的应用。具体结构式如(I)所示，其制备方法为将海藻内生真菌杂色曲霉(Aspergillus versicolor)DL‑29接种于真菌培养基中发酵培养，发酵产物经分离纯化后，即为式(I)所示的六环生物碱类化合物。本发明获得的生物碱类化合物，经抑菌活性实验得出化合物的最小抑菌浓度可达2微克/毫升。

技术领域

本发明涉及抑菌剂领域，具体地说是一种海藻内生真菌来源的天然六环生物碱类化合物及其制备方法和在抑菌方面的应用。

背景技术

水产养殖业在国民经济中占有重要的比重，目前水产养殖种类多样，但几乎所有养殖品种都受到疾病威胁。水产养殖病害频发，不仅造成重大的经济损失，也为水产品质量安全埋下了隐患。据水产养殖动物病害监测结果显示，近年来水产养殖病害种类高达200余种，其中细菌性疾病占48.0％以上。在细菌性水产动物疾病中，由弧菌属细菌引起的弧菌病是最主要的细菌性疾病，该病发生范围广、致死率高，且能够引起人畜共患，是水产养殖病害防治领域的主要难题之一。

近年来，随着水产养殖规模的发展和水产养殖过程中传统型抗生素的大量使用，水产养殖动物病原菌和养殖环境中细菌的多重耐药现象日趋普遍，并且化学合成药物的大量使用对水体和土壤带来了严重的污染，对生物和人类健康都造成了直接和潜在的危害。

与水产养殖业中使用的传统抗生素和化学合成药物相比，海洋生物源天然药物具有安全性高、针对性强、活性显著、对环境友好且能够解决目前大部分水产病害细菌对传统抗生素的耐药性问题，为解决目前水产养殖过程中的细菌性病害防治问题提供了新的思路。

发明内容

本发明的目的是提供一种六环生物碱类化合物及其制备和应用。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：

一种六环生物碱类化合物，六环生物碱类化合物结构如式(I)所示

一种六环生物碱类化合物的制备方法，将杂色曲霉(Aspergillus versicolor)DL-29接种于真菌培养基中发酵培养，发酵产物纯化后，即为式(I)所示的六环生物碱类化合物；所述的杂色曲霉(Aspergillus versicolor)DL-29于2011年11月25日保存于中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号为CCTCC M 2011421；

具体制备步骤：

1)将杂色曲霉(Aspergillus versicolor)DL-29接种于真菌培养基中静止发酵5-100天，而后经有机溶剂提取并浓缩，即为粗提物；

2)取步骤1)中的粗提物进行硅胶柱层析，用有机溶剂洗脱体系进行梯度洗脱，收集洗脱液，洗脱液经薄层层析检测；

3)收集步骤2)中洗脱组分再依次经反相硅胶柱层析、凝胶柱层析和薄层层析分离纯化，收集Rf值为0.6－0.7的组分，即得如式(I)所示的六环生物碱类化合物。

步骤1)中真菌培养基为现阶段任何真菌培养基，例如：大米固体培养基、马铃薯葡萄糖液体培养基、麦芽汁培养基或菊芋葡萄糖液体培养基。所述有机溶剂提取液为二氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、乙醇、丙醇或异丙醇中一种或几种。

步骤2)中的有机溶剂洗脱体系为石油醚-乙酸乙酯、石油醚-乙醇、石油醚-丙醇、石油醚-异丙醇、二氯甲烷-乙酸乙酯、二氯甲烷-甲醇、二氯甲烷-乙醇、二氯甲烷-丙醇、二氯甲烷-异丙醇中的一种或几种；其中，有机溶剂洗脱体系内两有机溶剂的体积比均为50-0:1。