[发明专利]一种连续深层发酵提取食用菌活性物质的方法

说明书

本发明提供了一种连续深层发酵提取食用菌活性物质的方法，将食用菌菌丝或子实体，在外加电磁场辅助下进行种子液培养，然后将种子液菌体进行固定化并使其带有磁性，将固定化的菌体，在高压脉冲电场的辅助下进行深层发酵。通过本发明所得到的食用菌活性物质具有以下优点：食用菌有效成分提取充分，生产周期大大减少。固定化菌体可进行多次发酵，磁性固定化菌体有利于产物的分离和纯化，降低下游技术的负担；改善了普通工艺提取食用菌活性物质存在的周期长、有效成分利用率低、染菌多等问题，为后续多元化生产提供技术基础。

技术领域

本发明属于发酵工程技术领域，具体的说涉及一种发酵技术提取食用菌活性物质的方法。

背景技术

食用菌作为一种兼备食用和药用双重功效的高等真菌，是最具潜力的微生物种类之一。食用菌子实体栽培历史悠久，但人工栽培时间长、技术复杂、受季节和原料的限制，因此，食用菌液体深层发酵技术应运而生。食用菌深层发酵目标产物有2个：一是液体菌种，代替固体菌种投入生产获得子实体；二是菌丝体及其代谢产物，获得子实体无法产生或含量高于子实体的生理活性物质。

磁场可以影响细胞的正常生理功能，利用磁化的溶液配制培养基对酵母细胞进行培养，与未用磁化溶液进行培养的相比酵母细胞数明显增多；利用较低磁感应强度培养红豆杉细胞，发现其细胞活力明显提高，次级代谢有所增强，可见合适的磁场对细胞具有正作用。但目前磁场辅助发酵存在生产周期长的问题。发明专利CN201310025724.7公开的一种高活菌含量复合微生物颗粒肥及其制备方法，利用微生物在液体深层发酵达到营养体数最多时，将物料导入3724高斯的磁场环境中驯化13小时，大大提高了有益菌的抗逆性能和保存时间。

高压脉冲电场是近年来一种新型的食品加工技术，它是将液态的样品溶液充当电解质，在电场中与容器绝缘的两个电极会产生高压电流，具有电脉冲作用，从而对食品进行连续的非热加工处理，目前主要用于食品杀菌方面，采用高压脉冲电场技术提取的物质理化结构、口感、风味等不容易被改变，并具有提取温度低，时间短、耗能低并且高效的特点。近年来，国内外利用高压脉冲电场技术提取食品中的有效成分，如多糖、蛋白质、DNA、可溶性钙、色素及维生素等。发明专利CN201610169995.3公开的一种复合真菌多糖及其组合物的功能性食品，利用高压脉冲电场对原料进行处理，提高多糖得率。研究发现，一定范围内电场强度的脉冲电场可以改变细胞膜的通透性，有利于细胞对外界物质的吸收以及细胞内容物的渗出，但是长时间的高压电场作用会是细胞破裂死亡，这对发酵是不利的。

固定化细胞技术最早用于发酵技术，该技术在一定程度上保护细胞免受发酵过程中的机械搅拌剪切损伤、增加细胞浓度和发酵强度、为实现细胞与产物分离提供便利；细胞固定化后细胞密度大、反应速度快、耐毒能力强、能实现连续操作，可大大提高生产能力。发明专利CN201610552601.2公开的一种温控性相变材料微胶囊载体固定化酶及其制备方法，解决传统载体固定化酶适用工作温度范围窄及储存稳定性、热稳定性和循环稳定性差的问题，使所固定酶的稳定性和活性得到显著提高。

发明内容

本发明针对目前深层发酵提取食用菌活性物质存在的工艺复杂，有效成分利用率低的问题，提供了一种连续深层发酵提取食用菌活性物质方法，本发明以磁场、微胶囊固定化技术，配合高压脉冲电场辅助进行深层发酵，操作简单，不仅可以缩短培养周期，获得高产、抗逆性强的菌体，还可以使食用菌有效成分得到充分提取，降低发酵过程中细胞死亡数，提高生产次数，实现连续操作，减少生产周期，具有很大的发展前景。

本发明的技术方案如下：

一种连续深层发酵提取食用菌活性物质的方法，包括以下步骤：

A1：取食用菌菌丝或子实体，洗净，干燥至水分含量为6~8%后，将其粉碎至100~120目获得粉末，将粉末与水按料液比1：（40~60）混合均匀，灭菌后得到种子料；