[发明专利]一种使用深共融溶剂提取测定玛咖中5种玛咖酰胺的方法

说明书

本发明具体涉及一种使用深共融溶剂提取测定玛咖中5种玛咖酰胺的方法，属于分析化学技术领域。其技术要点主要包括以下几个步骤：深共融溶剂的制备、待测溶液的制备、对照品混合液的制备、标准曲线的建立、待测样品中玛咖酰胺含量的测定。本发明的提取方法使用的深共融溶剂有较好的化学稳定性、可设计性和可循环使用，原料廉价易得且绿色环保，合成工艺简单并且不需要引入其它有机溶剂就可获得高纯度的产物，原子经济性达100％，解决了传统提取方法有机溶剂毒性大、提取率低、成本高、提取时间较长、提取次数多的问题。

技术领域

本发明属于绿色提取分离技术领域，具体涉及一种使用深共融溶剂提取测定玛咖中5种玛咖酰胺的方法。

背景技术

玛咖(Lepidiummeyenii)为十字花科独行菜属的一种一年生草本植物，最早生长在海拔超过4000米的秘鲁中央的安第斯山区，具有2000年的食用历史。玛咖的根茎部分比地上部分具有更高的营养价值，根形似小圆萝卜，外形颜色有紫、黑、黄等。研究表明玛咖具有丰富的营养价值和药用价值，玛咖还具有许多传统的疗效，如作为泻药、治疗风湿病、呼吸道疾病、痛经及女性更年期综合征等。另外，玛咖还具有改善性功能、提高人畜生育能力、缓解疲劳及抗氧化等功能。基于以上特点，玛咖被称为“秘鲁人参”。玛咖中的玛咖酰胺被视为主要的活性功能成分，是评价玛咖质量的重要标准。

目前对提取玛咖酰胺的溶剂很多，但都是有机化合物，对人体危害大、对环境污染较严重。而深共融溶剂有较好的化学稳定性、可设计性和可循环使用等优点，与有机溶剂相比还具有原料廉价易得且绿色环保，合成工艺简单并且不需要引入其它有机溶剂就可获得高纯度的产物，原子经济性达100％。目前用深共融溶剂(DESs)提取中药中有效成分的方法已有报道，但是用DESs提取玛咖中玛咖酰胺的报道还没有出现。

发明内容

为弥补现有技术的不足，本发明提供的采用DESs做提取剂提取玛咖中5种玛咖酰胺并用HPLC测定其含量的方法，提取含量比石油醚高，并且简便快捷，有较好的化学稳定性、可设计性和可循环使用等优点，是一种分析玛咖酰胺类成分的有效途径，有望替代有机溶剂来提取玛咖中玛咖酰胺。

本发明的技术方案如下：一种使用深共融溶剂提取测定玛咖中5种玛咖酰胺的方法，包括以下步骤：

(1)深共融溶剂的制备

氯化胆碱经真空干燥12h后，按照摩尔比为1:2分别称取氯化胆碱和1,6-己二醇置于圆底烧瓶中，在80℃下加热回流搅拌直到形成均匀的液体，然后再反应4个小时即得到无色透明的深共融溶剂；

(2)待测溶液的制备

将玛咖粉末按照1g:10mL料液比加入含30wt％水的深共融溶剂中，70℃下超声波提取30min，离心后上清液即为提取液；将提取液溶解于甲醇中得到待测溶液，其中提取液的体积浓度为10％；

(3)对照品混合液的制备

分别精密称取N-(间-甲氧基苄基)-亚麻酰胺、N-苄基亚麻酰胺、N-(间甲氧基苄基)-亚油酰胺、N-苄基亚油酰胺、N-苄基十六烷酰胺对照品，用甲醇分别溶解后混合，配制成多组对照品混合液，所述对照品混合液中各对照品的质量浓度介于0.5～2000μg/mL范围内；

(4)标准曲线的建立

分别吸取步骤(3)中多组对照品混合溶液，进行液相色谱测定；

色谱条件如下：色谱柱为XtimateXB-C18色谱柱4.6×250mm，5μm；流动相：流动相A为水，流动相B为乙腈；梯度：0～24min，80vt％流动相B～100vt％流动相B；检测器为G4212-60008二极管阵列检测器，检测波长210nm、280nm；流速0.8mL/min；柱温40℃；进样量10μL；

以步骤(3)中各对照品混合液的质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标做标准曲线；