[发明专利]一种用于血清中galectin-3浓度检测的电化学传感器制备方法

说明书

本发明涉及引发2型糖尿病的胰岛素灵敏度降低早期诊断生物标志物‑galectin‑3(Gal‑3)的血液浓度水平检测的电化学传感器的制备方法及应用，属于电化学检测技术领域。其特征在于：首先分别合成N‑GNRs‑Fe‑MOFs@AuPNs传感器基底修饰纳米复合材料和AuPt‑MB纳米复合信号材料，再将能与Gal‑3特异性结合检测抗体与AuPt‑MB复合材料混合，制得生物信号探针。然后在N‑GNRs‑Fe‑MOFs@AuPNs复合材料修饰的基底平台上接合Gal‑3特异性捕获抗体，以便于特异性捕获目标物Gal‑3。最后通过Gal‑3与其检测抗体和捕获抗体的特异性结合，制备得到了Gal‑3的血液浓度水平检测的电化学传感器，该传感器成功的用于血清中Gal‑3的检测。本发明的优点在于灵敏度高，特异性强，检测迅速，方便。本发明为引发2型糖尿病的胰岛素抵抗提供早期的诊断依据。

技术领域：

本发明涉及引发2型糖尿病的胰岛素灵敏度降低早期诊断生物标志物-galectin-3(Gal-3)的血液浓度水平检测的电化学传感器的制备方法及应用，尤其是基于AuPt-MB纳米复合材料作为新型信号探针制备的夹心型免疫生物传感器，用于血清中galectin-3(Gal-3)浓度检测，属于电化学检测领域。

背景技术：

糖尿病在全球范围内迅速增长，对人类健康已构成严重威胁。特别是由胰岛素灵敏度降低引起的2型糖尿病(T2D)能够导致致死性的心血管并发症，并占据糖尿病患病率的90％。在最近的研究中发现，galectin-3(Gal-3)能直接与胰岛素受体结合抑制下游胰岛素受体(IR)信号传导和链接炎症降低胰岛素敏感性，最终导致胰岛素抵抗和葡萄糖不耐受，引发2型糖尿病。因此，监测血液中Gal-3浓度水平的变化，对预防T2D及其心血管并发症尤为重要。

在目前对Gal-3进行检测的主要传统方法有：酶联免疫吸附测定(ELISA)，免疫组化和“常规Gal-3”测定(雅培诊断)。然而，这些传统方法相对存在着昂贵，费时，半定量，需要熟练的操作者，灵敏度有限和线性范围窄等缺点的限制。特别是不能满足早期检测的临床需求。因此，探索研究一种用于Gal-3的简便，快速和灵敏的检测方法显得格外重要。与传统的检测方法相比，电化学免疫传生物感器检测方法因其具有灵敏度高，特异性强和快速检测等优点，近年来在临床蛋白生物标志物检测方面越来越受到重视。同时，基于纳米材料的电化学生物传感器由于简便，快速，成本低，灵敏度高等优势而被广泛应用于生物样品的检测。因此，基于纳米复合材料构建一种夹心式电化学免疫生物传感器为实现血清中Gal-3的低浓度高灵敏检测提供了一种新思路。

亚甲基蓝(MB)是一种吩噻嗪染料的衍生物，由于其结构中存在富含电子的硫和氮杂原子作为一种新兴的电化学氧化还原活性物质被广泛用地应用于催化、感测和氧化还原指示等领域。然而，由于其不均匀的形态使其在免疫传感器信号探针方面的应用收到限制。为解决这一问题，本发明创新性地引入了具有比表面积大、导电性强和生物分子兼容性好AuPt双金属纳米材料与MB发生氧化聚合反应，得到了具有均匀棒状形态AuPt-MB纳米复合材料，并且显示出显著的电化学活性。在本发明中将AuPt-MB纳米复合材料与Gal-3特异性检测抗体Ab2结合，并用BSA做封闭剂制备得到新型纳米信号探针。