[发明专利]一种非均一组分的树蝴蝶精制多糖及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种非均一组分的树蝴蝶精制多糖的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

(1)将树蝴蝶在蒸馏水中进行回流提取，采用大孔吸附树脂对提取液进行脱色处理，再采用沉淀剂进行沉淀，离心，收集沉淀物并干燥，得到树蝴蝶粗多糖；

(2)将树蝴蝶粗多糖配制成多糖溶液，转入装有经过预处理的DEAE-52树脂的层析柱中，依次用0～0.28mol/L NaCl溶液、0.3mol/L NaCl溶液洗脱，收集0.3mol/L NaCl溶液洗脱的洗脱液，苯酚-硫酸法跟踪检测洗脱液，测定490nm下的吸光度，绘制洗脱曲线，同一吸收峰内的洗脱液合并；然后旋蒸浓缩，真空冷冻干燥，得到非均一组分组分的精制多糖，0.3mol/L NaCl洗脱得到的精制多糖记为LKY-III。

2.根据权利要求1所述非均一组分的树蝴蝶精制多糖的制备方法，其特征在于：

所述树蝴蝶粗多糖的具体制备方法为；

(1-1)将树蝴蝶粉碎过筛，得到树蝴蝶粗粉；向树蝴蝶粗粉中加入蒸馏水进行超声处理，加热回流提取，抽滤，并将滤液浓缩，得到浓缩的树蝴蝶粗多糖溶液；

(1-2)将树蝴蝶粗多糖溶液和大孔吸附树脂混合，脱色处理，过滤出多糖溶液，并用水反复洗出树脂中吸附的多糖，将脱色后的多糖溶液合并，减压浓缩，得到浓缩糖液；

(1-3)向浓缩糖液中加入沉淀剂进行沉淀，离心，收集沉淀物并干燥，得到树蝴蝶粗多糖。

3.根据权利要求1或2所述非均一组分的树蝴蝶精制多糖的制备方法，其特征在于：所述脱色处理的条件为于40～60℃水浴2～4h；

所述沉淀剂为无水乙醇或体积分数为90～100％的乙醇溶液；所述沉淀的温度为0～4℃；

所述大孔吸附树脂选用为D354FD树脂。

4.根据权利要求1或2所述非均一组分的树蝴蝶精制多糖的制备方法，其特征在于：所述大孔吸附树脂在使用前需进行预处理，预处理的方法为：将大孔吸附树脂依次采用蒸馏水、盐酸浸泡，洗涤至中性，再用氢氧化钠溶液浸泡，再洗涤至中性，得到经过预处理的大孔吸附树脂。

5.根据权利要求4所述非均一组分的树蝴蝶精制多糖的制备方法，其特征在于：所述蒸馏水浸泡的时间为12～24h，盐酸的浓度为3～5wt％，盐酸浸泡的时间为0.5～3h，氢氧化钠溶液的浓度为3～5wt％，氢氧化钠溶液浸泡的时间为0.5～3h。

6.根据权利要求2所述非均一组分的树蝴蝶精制多糖的制备方法，其特征在于：步骤(1-1)中所述超声功率为60～400W，超声时间是10～20min；

步骤(1-1)中所述浓缩为减压浓缩，浓缩的温度为40～60℃；步骤(1-2)中所述减压浓缩的温度为40～60℃；

步骤(1-3)中所述沉淀剂的加入量为浓缩糖液体积的3～5倍。

7.根据权利要求1或2所述非均一组分的树蝴蝶精制多糖的制备方法，其特征在于：所述加热回流的温度为75～100℃；所述加热回流提取的时间为2～4h；所述加热回流提取的次数为2～4次；

所述树蝴蝶与蒸馏水的质量比为1:20～1:30；热水回流提取多次时，树蝴蝶与每一次使用的蒸馏水的质量比为1:20～1:30；

所述沉淀的时间为8～24h；

所述离心的转速为3000～5000r/min；所述离心的时间为12～15min；所述干燥的温度为40～60℃。

8.根据权利要求1所述非均一组分的树蝴蝶精制多糖的制备方法，其特征在于：

所述记为LKY-III的树蝴蝶精制多糖为非均一组分。

9.一种非均一组分的树蝴蝶精制多糖由权利要求1～8任一项所述制备方法得到。

10.根据权利要求9所述非均一组分的树蝴蝶精制多糖的应用，其特征在于：所述非均一组分的树蝴蝶精制多糖在制备抗癌、抗氧化和/或免疫增强药物中的应用。