[发明专利]一种食用菌复壮型菌株的生产方法

权利要求书

1.一种食用菌菌株复壮的方法，包括如下步骤：

（1）种菇选择

复壮型菌株生产用种菇要求菇形理想，长势健壮，无虫无病的子实体，选择器官分化尚未结束时菌膜与菌柄相连的幼菇，或依据具体食用菌种类的分化特点选择相应生长旺盛的组织部位；

（2）组织分离

将选择的种菇用无菌水冲洗后，用75%的酒精溶液表面消毒，在无菌条件下，采用经火焰灼烧过的手术刀片从菌柄或菌盖中部纵切、撕开，挑取菌盖与菌柄交界处的直径3-5mm的组织块，转接于事先制作的母种、直径90 mm的无菌培养基培养皿中央，倒置，24℃暗培养5-7天；

（3）单根菌丝分离

将培养好的平板置于在普通正置光学显微镜下，采用10倍目镜，在菌落边缘处，筛选生物学性状典型，且生长势强的单根菌丝，采用事先灭菌的特制接种针，将挑选的单根菌丝自距顶端15-20μm处切断，将切下的菌丝片段挑出，转接于母种无菌斜面培养基前端，共计挑取50-60次，分别转接于事先制作的50-60支母种无菌斜面培养基，并依次编号，斜面向下，24℃暗培养10-15天；

（4）转接复壮

无菌条件下，从（3）制备的母种无菌斜面培养基内的距菌落边缘2-3cm处挑取5-7 mm的菌丝块，分别转接入新的母种、直径90 mm的无菌培养基培养皿中央，24℃暗培养8-10天，剔除菌丝生长势较差的培养皿所对应的试管种；

（5）培养料筛选

将保留的菌丝生长势较强的试管种重新编号，剔除菌丝分解基质能力弱的菌株，保留分解基质能力强的菌株；

（6）出菇验证

对保留的菌丝生长势较强的试管种，分别进行菌落形态观察和接种于出菇培养基中进行出菇实验验证，并测定其农艺学性状与栽培性状，从而获得备选复壮型菌株；

（7）生产中试试验

采用出菇培养基对备选复壮型菌株进行较大规模的生产试验，并进行生产性能测定，从而确定最终的生产用复壮型菌株。

2.根据权利要求1所述的食用菌菌株复壮的方法，其特征在于，所述步骤（4）的菌丝块包含培养基。