[发明专利]一种用于测定禽蛋及禽蛋制品中五氯酚残留量的方法

权利要求书

1.一种用于测定禽蛋及禽蛋制品中五氯酚残留量的方法，其特征在于包括如下步骤：

1)提取：取具有代表性的禽蛋及禽蛋制品样品，充分混匀后称取1.0～5.0g于一离心管中，加入4～6μL的1.0mg/L ¹³C₆-PCP内标使用液和5～15mL的含5.0％～10.0％(V/V)三乙胺的乙腈-水溶液(60～80/40～20,V/V)，匀浆，超声提取5～15min，涡旋5～15min，倾倒出上清液于另一离心管中，然后8000～9000r/min离心4～6min，吸取4～6mL上清液于具塞试管内，加入1.5～2.5mL水，混匀后，待净化；

2)富集净化：将上述提取液加入已经用水和甲醇活化和平衡的混合型阴离子交换小柱中，控制流速1.5～2.5mL/min，然后分别用甲醇、水以及含1.0％～5.0％(V/V)甲酸的甲醇/水溶液(50/50，V/V)进行淋洗，吹干后用含6.0％～15.0％(V/V)甲酸的甲醇溶液分次洗脱，并收集，洗脱液于35～45℃氮气吹至近干，用甲醇复溶并定容至1.0mL，经0.18～0.22μm滤膜过滤后，供液相色谱串联质谱测定。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述禽蛋及禽蛋制品为鸡蛋、鸭蛋、鹌鹑蛋或蛋糕中的一种。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1)中的乙腈-水溶液的体积比为60:40、70:30、80:20中的一种，三乙胺-(乙腈-水溶液)的混合液中三乙胺与乙腈-水溶液的体积比为5～10:100。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述乙腈-水溶液的体积比为70:30，三乙胺与乙腈-水溶液的体积比为8:100。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤2)中的混合型阴离子交换小柱采用的填料是磁性胺基化阴离子交换复合材料和普通C18填料按重量比70mg/30mg、80mg/20mg、90mg/10mg、100mg/0mg混合而成，小柱是采用6mL空管填装而成，填料量为150mg，用于淋洗的甲醇、水以及含1.0％～5.0％(V/V)甲酸的甲醇/水溶液均为6mL。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述磁性胺基化阴离子交换复合材料是一种采用N-乙烯基吡咯烷酮和四乙烯五胺(TEPA)在已经包覆二氧化硅的磁性四氧化三铁表面经聚合反应而获得的复合材料，该复合材料为球形，直径为30～80μm，比表面积300～600m²/g，碳载量2～5％，交换容量0.5～2meq/g，磁性胺基化阴离子交换复合材料与普通C18填料的重量比为80mg/20mg。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤2)中含1.0％～5.0％(V/V)甲酸的甲醇/水溶液中甲酸的含量为1.0％、2.0％、3.0％、4.0％和5.0％(V/V)中的一种；含6.0％～15.0％(V/V)甲酸的甲醇溶液中甲酸的含量为6.0％、7.0％、8.0％、9.0％、10.0％、11.0％、12.0％、13.0％、14.0％和15.0％(V/V)中的一种。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述步骤2)中含1.0％～5.0％(V/V)甲酸的甲醇/水溶液(50/50，V/V)中甲酸的含量为2.0％；含6.0％～15.0％(V/V)甲酸的甲醇溶液中甲酸的含量为10.0％。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述液相色谱串联质谱分析分析采用XR-ODS III(150mm×2.1mmi.d.,2.2μm)柱，以含5mmol/L乙酸铵和0.1％甲酸的水溶液(A相)和含5mmol/L乙酸铵和0.1％甲酸的乙腈溶液(B相)为流动相进行梯度洗脱。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：所述梯度洗脱的程序：0-1.00min：40％～90％(B相)，1.00-3.00min：90％(B相)，3.00-3.01min：90％～40％(B相)，3.01-5.00min：40％(B相)；离子源：电喷雾电离(ESI)；扫描方式：负离子扫描；定量方式：多反应监测模式(MRM)，同位素内标法；PCP定量离子对(m/z)：264.8>35.0，266.8>35.0；¹³C₆-PCP定量离子对(m/z)：270.8>35.0，272.8>35.0；离子源温度(TEM)：500℃；扫描时间：50ms；碰撞室出口电压(CXP)：10.0V；碰撞室入口电压(EP)：10.0V。