[发明专利]与PD-L1结合的重复域锚定蛋白及其用途

说明书

本发明涉及与PD‑L1结合的重复域锚定蛋白及其用途。该重复域锚定蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.10所示；其中，第30位、第32位、第40位、第41位、第53位、第54位、第57位、第58位、第61位、第63位、第71位、第72位、第86位、第87位、第88位、第89位、第92位、第94位、第102位、第103位、第117位、第118位、第119位、第120位的Xaa分别为任意氨基酸。该蛋白用途为用于制备抗肿瘤药物或药物组合物。本发明的重组锚定蛋白能与PD‑L1分子特异结合，并起到阻断PD‑1/PD‑L1途径的作用，从而起到治疗相关肿瘤的作用。

技术领域

本发明涉及一种与PD-L1结合的重复域锚定蛋白，该蛋白能用于制备治疗肿瘤的药物或药物组合物，属于生物医药技术领域。

背景技术

近些年来，最有希望激活抗肿瘤免疫治疗的方法就是免疫检查点阻断。免疫检查点是指一系列与免疫系统相关的抑制途径，免疫检查点对于维持细胞自身耐受性并调节外周组织中生理学免疫应答的持续时间和幅度至关重要，它能够尽量减少周围组织损伤。在T细胞中，共刺激信号和抑制信号(即免疫检查点)之间的平衡调节着T细胞受体(TCR)识别抗原启动免疫反应的幅度和质量。在正常生理条件下，免疫检查点能够维持自身耐受也就是预防自身免疫，当免疫系统对病原性感染有反应时也能保护组织免受损伤。但是，肿瘤能够通过某些免疫检查点途径来形成免疫抵抗或者免疫逃离，尤其是针对肿瘤抗原特异性的T细胞的免疫逃离，这也是T细胞无法消灭肿瘤的一个重要原因。PD-1/PD-L1途径是当前已知的肿瘤细胞产生免疫逃离的重要免疫检查点之一。它是由PD-1与PD-L1之间的相互作用引发的，因此，通过抗体阻断PD-1与PD-L1之间的相互作用可以对肿瘤的免疫治疗效果进行有效的调节。

通过靶向PD-1/PD-L1途径治疗癌症在以下方面具有独特优势：

首先，靶向PD-1/PD-L1途径的治疗作用主要是针对肿瘤位点局部进行的。虽然PD-L1在肿瘤细胞上是高表达的，但是在大多数正常组织中并不存在PD-L1；PD-L1可以在肿瘤微环境中通过细胞因子IFN-γ由正在进行的免疫应答诱导表达。这种PD-L1具有的肿瘤定位效果决定了无论采用靶向配体的抗体还是采用靶向受体的抗体都能够于正在进行免疫应答的肿瘤微环境中起作用。

其次，靶向PD-1/PD-L1途径能够修复肿瘤相关的免疫缺陷。PD-L1分子是肿瘤介导免疫逃离机制中的关键分子。PD-L1与PD-1的相互作用通过数种不同机制导致T细胞功能缺陷，包括：对抗原刺激的无反应性，T细胞功能耗竭，细胞凋亡，诱导免疫抑制细胞和分泌抑制性细胞因子如IL-10。另外，肿瘤细胞上PD-L1的逆转信号被视为是一种“分子屏障”，可以保护肿瘤免受CTL细胞的杀伤。同时，PD-1/PD-L1相关的免疫缺陷不是永久性的，它可以通过终止该信号途径，尤其是通过采用PD-L1的抗体或PD-1的抗体阻断该信号途径来修复该免疫缺陷。

第三，对PD-1/PD-L1途径的阻断旨在使抗肿瘤免疫反应正常化，但一般不会过度激活免疫反应。阻断PD-L1或PD-1不是简单地扩大免疫能力，而是将抗肿瘤免疫反应重新调整到所需水平。

针对PD-1和PD-L1的免疫检查点抑制剂已经在超过15种癌症(包括黑色素瘤、非小细胞肺癌NSCLC、肾细胞癌RCC、膀胱癌和霍奇金淋巴瘤等)中证实了前所未有的临床疗效。因此，FDA批准了两个抗PD-1的单抗药物nivolumab和pembrolizumab，及一个抗PD-L1的药物MPDL320A来治疗多种肿瘤。迄今为止，靶向PD-1/PD-L1的抗肿瘤免疫治疗是最有效的癌症治疗方法之一，该疗法具有良好的耐受性，可以作为单一疗法使用。然而，该疗法也存在一定缺陷，并非完美，虽然有很多患者在接受该疗法后状况有所改善，但是并不是对所有患者都起到这样的效果。另外，在肿瘤环境中使用靶向抗体有一个常见的问题，即渗透性不够。IgG分子过大，在肿瘤组织中的分布就要受到血管、摄入口、细胞密度等因素的限制。因此，研发出高亲和力高渗透性的低分子量类抗体药物十分有意义。

发明内容