[发明专利]间充质干细胞的采集装置及采集方法

说明书

本发明涉及一种间充质干细胞的采集装置及采集方法，所述间充质干细胞的采集装置包括互相连通的储液装置和储物装置，所述储液装置用于容纳血液和/或骨髓液，所述储物装置用于容纳多孔生物陶瓷；所述血液和/或骨髓液往复流动于所述储液装置和所述储物装置之间，并在所述储物装置中被所述多孔生物陶瓷过滤，以使血液和/或骨髓液中的间充质干细胞存留在所述多孔生物陶瓷上。该采集装置及采集方法在无菌环境内进行，可避免化学和生物污染的可能性，达到复合后的产品能即刻用于临床。该方法及装置可用于生物、制药、医学和兽医等域。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种间充质干细胞的采集装置及采集方法。

背景技术

间充质干细胞是干细胞家族的重要成员，来源于发育早期的中胚层和外胚层，属于多能干细胞，目前已经可以从多种组织中分离出间充质干细胞，包括骨膜、松质骨、脂肪、骨骼肌、骨髓液和血液等。因其具有多向分化潜能、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人们的关注。间充质干细胞在体内或体外特定的诱导条件下，还具有分化为肌细胞、肝细胞、成骨细胞、软骨细胞、基质细胞等多种细胞的能力，也可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织器官损伤修复。

间充质干细胞采集的现有技术：

1)贴壁筛选法：最常用的骨髓基质干细胞筛选方法。利用细胞贴壁时间及贴壁牢固性的不同，逐步将非贴壁细胞和其它杂质细胞去除。但需要时间较长，涉及细胞的体外培养，临床使用有一定难度。

2)密度梯度离心法：利用一定的惰性梯度介质(如Ficol溶液等)在离心管内形成连续或不连续的密度梯度，将细胞混悬液或匀浆置于介质顶部，通过重力或离心力的作用使细胞分层分离。但较长时间的高速离心，难免影响细胞活力，因此，原代细胞生长较慢，短期不能大量扩增。

3)流式细胞仪分离法：应用特异的荧光抗体与细胞表面的抗原标志相结合，然后应用流式细胞仪对其进行分选。虽然分离迅速纯度高，但是费用昂贵，对痕量细胞难以分离，不能处理大量的样品。

4)免疫磁珠分离法：基于细胞表面抗原能与连接有磁珠的特异性单抗相结合，在外加磁场中，通过抗体与磁珠相连的细胞被吸附而滞留在磁场中，无该种表面抗原的细胞不能与连接磁珠而被排除，从而使细胞得以分离。但对细胞损伤大，回收率低，价格昂贵。

除上述常用技术外，近年出现了一些新方法。利用明胶溶液破坏红细胞表面电荷而加速红细胞沉积；利用密度梯度离心而使各种细胞成分按密度梯度重新分布聚集，从而分离出骨髓中的单个核细胞。还有采用人新鲜脐带经胶原酶消化后分离培养而成，适于冷冻保存。另外通过与细胞外基质粘附而从脐带血分离间充质干细胞。上述干细胞分离方法对快速、有效、简易和无污染的临床应用要求仍有很大距离。人体血液和骨髓液中含有丰富的间充质干细胞，如何采集和即时使用是急待决定的问题。

发明人研究发现人体血液和骨髓液中细胞分为有核细胞和无核细胞，而间充质干细胞属于有核细胞。红细胞为无核细胞，呈双凹圆盘状，直径6～9.5微米，平均7.2微米。血小板直径2～4微米，呈双凸扁盘状。白细胞直径6～20微米不等，呈无色有核细胞。研究发现机械应力干预下体外培养时，细胞形态、结构、功能和分化都会受到影响。Akhouayri等发现动态载荷下细胞会变圆变大，而静态载荷下细胞被拉伸并沿拉伸轴排列。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种间充质干细胞的采集装置及采集方法，以解决间充质干细胞采集困难的问题。

为解决上述技术问题，本发明提供一种间充质干细胞的采集装置，包括互相连通的储液装置和储物装置，所述储液装置用于容纳血液和/或骨髓液，所述储物装置用于容纳多孔生物陶瓷；

所述血液和/或骨髓液往复流动于所述储液装置和所述储物装置之间，并在所述储物装置中被所述多孔生物陶瓷过滤，以使血液和/或骨髓液中的间充质干细胞存留在所述多孔生物陶瓷上。