[发明专利]一种荧光微量RNA的检测装置及检测方法

说明书

技术领域

本发明属于生物检测技术领域。

背景技术

基因(DNA或RNA)是遗传信息的载体，在生物的个体生长、发育、繁殖、遗传和变异等生命过程中起着极为重要的作用。目前医学常用的RNA定量方法主要包括紫外分光光度(260nm)、荧光定量PCR技术等。但紫外分光光度法常常受到DNA、蛋白的干扰，特异性定量较差，灵敏度相对荧光检测也较低，需要消耗的样本量大等，不能实现RNA的特异定量。荧光定量PCR技术是近年来发展起来的新型技术，具有定量迅速、特异性强、灵敏度高等特点，但其所耗成本昂贵，定量结果易受样本RNA质量的影响，客观地限制了仪器的小型化与便携化。

发明内容

本发明的目的是：提供一种荧光微量RNA的检测装置及方法，它采用荧光染料与特异性的RNA靶分子结合，即使在低浓度时，荧光染料与靶分子结合时也会发射荧光信号。

本发明的技术方案是：

本装置包括激发光源A、激发光源B、激发光探测单元A、激发光探测单元B、荧光探测单元A、荧光探测单元B、滤光片A、滤光片B、滤光片C、滤光片D、样品槽、光传输通道、信号检测单元、主控单元、激发光控制单元、液晶显示单元、电路板、壳体、样品槽盖、屏蔽罩。

激发光源A(1)位于样品槽(11)左侧，激发光源B(2)位于样品槽(11)右侧，分别焊接在电路板(17)上，嵌于光传输通道(12)内，用于激发样品中的荧光物质。

激发光探测单元A(3)位于激发光源A(1)与样品槽(11)之间，激发光探测单元B(4)位于激发光源B(2)与样品槽(11)之间，激发光探测单元B(4)与样品槽(11)高度均低于激发光源B(2)，激发光探测单元B(4)与样品槽(11)焊接在电路板(17)上，嵌于光传输通道(12)内，保证激发光可以照射到样品槽(11)内样品，用于对激发光的状态进行实时监测，确认激发光是否正常工作、光强度是否稳定。

荧光探测单元A(5)、荧光探测单元B(6)分别垂直位于样品槽(11)与激发光光路的两侧，焊接于电路板(17)上，嵌于光传输通道(12)内。接收并检测由样本槽(11)内待测样本发出的荧光信号强度，均采用高精度、高灵敏度的光电二极管，可提高荧光检测精度，测量范围为300-1,000nm。这些荧光染料只有与这些靶分子结合时才会发射荧光信号，即使在浓度很低时，避免不准确测量带来的重复工作。发射通道：绿光510–580nm、红光665–720nm。选择蓝光激发时，读取绿色或远红外通道的荧光。当激发光为红光时，只读取远红外通道的荧光。

光传输通道(12)为封闭式光传输通道，底部通过膨胀螺栓固定于电路板(17)上，将光路各个组件进行了很有效的保护，收集激发光源A(1)、激发光源B(2)发射光，分别通过滤光片A(7)、滤光片B(8)到达样品槽(11)，并收集激发的荧光信号，通过滤光片C(9)、滤光片D(10)到达荧光探测单元A(5)、荧光探测单元B(6)。能有效消除外界杂散光的干扰，而且可以阻止灰尘对光路组件的污染，使光传输更洁净，大大提高了检测的准确性及灵敏度。

滤光片A(7)、滤光片B(8)分别位于激发光源A(1)、激发光源B(2)与样品槽(11)之间，嵌于光传输通道(12)内，用于滤除激发光之外的杂散光；所述滤光片C(9)、滤光片D(10)分别位于样品槽(11)与荧光探测单元A(5)、荧光探测单元B(6)之间，用于滤除荧光之外的杂散光。

信号检测单元(13)焊接在电路板(17)上，用于将荧光探测单元A(5)、荧光探测单元B(6)转换的电信号，进行前置放大、解调、滤波、采集。

主控单元(14)焊接在电路板(17)上，采用的双核处理器，5秒内快速准确地定量DNA，RNA和蛋白。将结果数据显示到液晶显示屏(16)，并存储。

激发光控制单元(15)焊接在电路板(17)上，用于控制激发光源A(1)、激发光源B(2)输出光强度。

液晶显示单元(16)镶嵌于壳体(18)上表面，通过通讯线缆与电路板(17)连接，用于人机交互，功能选择，数据存储。

样品槽盖(19)位于样品槽(11)之上，采用不透光材料制作，检测时将其盖严，用于减少环境中的杂散光对实验结果的影响。

屏蔽罩(20)罩位于光传输通道(12)之上，采用薄铝材料，用于屏蔽电磁信号干扰，可有效提高信噪比。

检测方法是：

采用PikoGreen dsDNA定量试剂盒(Broad Range)，其具有线性dsDNA特异性好、线性范围宽、操作简便等特点。