[发明专利]一株约氏不动杆菌EAb‑1及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种约氏不动杆菌EAb-1及其应用。

背景技术

根结线虫病是一种严重的植物线虫寄生性病害，常造成严重的经济损失。根结线虫病害的防治是目前农业生产上亟待解决的难题。传统的防治措施主要包括化学防治、轮作和使用抗病品种等，但这些防治措施都有其局限性。利用微生物防治根结线虫，具有可持续发展的优势，是根结线虫病害可持续治理的理想途径之一。

利用生防细菌防治根结线虫的研究报道，主要有根围促生细菌、穿刺巴氏杆菌、假单胞杆菌、苏云金芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、类芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌等，它们在线虫生物防治中有着巨大的开发潜力，其价值也逐渐被人们认知。但是，现有的生防细菌防治根结线虫的效果仍需改善加强，新的生防细菌也需要继续开发。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新型约氏不动杆菌EAb-1。

本发明的再一目的在于提供上述约氏不动杆菌EAb-1在防治防治杆线虫以及/或促进紫茎泽兰生长方面的应用。

本发明是这样实现的，一株约氏不动杆菌EAb-1(Acinetobacter johnsonii EAb-1)，该菌于2017年5月5号保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.14101。

本发明进一步公开了上述约氏不动杆菌EAb-1在防治杆线虫方面的应用。

本发明进一步公开了上述约氏不动杆菌EAb-1在促进紫茎泽兰生长方面的应用。

本发明克服现有技术的不足，提供一种约氏不动杆菌EAb-1及其应用。本发明的约氏不动杆菌EAb-1从紫茎泽兰植株中分离得到，该约氏不动杆菌EAb-1，该菌于2017年5月5号保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC No.14101。

相比于现有技术的缺点和不足，本发明具有以下有益效果：

(1)本发明约氏不动杆菌EAb-1对秀丽隐杆线虫和南方根结线虫均有很好的致死活性，在菌液OD600值为0.016时，开始表现杀虫活性，OD600值为0.5时，对秀丽隐杆线虫和南方根结线虫致死率达到最高为100％；

(2)本发明约氏不动杆菌EAb-1能有效促进紫茎泽兰的生长。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1约氏不动杆菌EAb-1的筛选和鉴定

紫茎泽兰采自云南农业大学化学楼附近，将紫茎泽兰整株采回，用清水洗净，将根、茎、叶分段放置。在超净工作台内采用表面灭菌法去除紫茎泽兰植株表面的杂菌污染，用30％过氧化氢清洗30s，75％酒精清洗2min，无菌水清洗三次。

1、灭菌

所用培养皿、离心管、试管，枪头等实验器材及无菌水采用高压灭菌，0.1MPa，121℃，灭菌30分钟。

2、研磨

将灭菌后的紫茎泽兰根、茎、叶分别放入无菌的研钵中，在超净工作台里进行研磨。

3、梯度稀释

将研磨后的汁液取1ml放入盛有9ml无菌水的试管中，即为10^-1稀释度的菌液，再从10^-1稀释度的菌液中取1ml放入盛有9ml无菌水的试管中，即为10^-2稀释度的菌液，以此类推制成10^-3、10^-4、10^-5、10^-6、10^-7稀释度的菌液。

4、平板涂布

细菌的分离常用的培养基是牛肉膏蛋白胨培养基(NA培养基)，纯化常用LB培养基。倒平板，每个培养皿倒大约15ml的培养基，平放静置，待冷却备用。

将稀释菌液10^-4、10^-5、10^-6、10^-7分别涂布于平板上，每个梯度涂三皿。在皿低做上标记。

5、培养

倒置平皿于28℃培养箱中培养3～5天。

6、菌的纯化

在无菌条件下用挑针将NA培养基上长出的单菌落挑取于LB培养基上划线培养。纯化3～4次可得纯化后的单菌落。

实施例2约氏不动杆菌EAb-1的生物学鉴定